[发明专利]一种细胞内ATP的荧光成像方法

摘要

本发明提供了一种可用于生物医学及生命科学领域的细胞内ATP的荧光成像方法。本发明通过采用基于静电作用修饰的金纳米笼‑核酸适体的纳米荧光探针进行细胞内ATP的荧光成像研究，该方法所采用的新型纳米荧光探针设计巧妙，结构简单，对细胞内ATP选择性好、细胞毒性小、细胞膜渗透能力强、胞内释放可控性强、在细胞内的分散性好，利用其作为活细胞内ATP的荧光成像纳米探针，可实现细胞内ATP的荧光成像检测的研究和应用。该成像方法在生物医学、生命科学等领域具有较大的应用潜力和广阔的应用前景，可用于细胞内ATP的特异性成像检测，为癌症等重大疾病的早期诊断及治疗提供新的途径和方法。

主权项

1.一种细胞内ATP的荧光成像方法，其特征在于：该成像方法采用的纳米荧光探针包括ATP核酸适体链和金纳米笼，ATP核酸适体链是通过静电作用被组装到金纳米笼表面；所述ATP适体链为：ACC TGG GGG AGT ATT GCG GAG GAA GGT；所采用的纳米荧光探针采用Pdda‑即聚二烯丙基二甲基氯化铵对纳米载体表面进行正电荷修饰；包括如下步骤：(1)取适量细胞，离心分离，移除上清液；(2)加入基于静电作用修饰的纳米荧光探针，孵育一段时间后进行激光共聚焦扫描成像实验；其中，所述的基于静电作用修饰的纳米荧光探针的制备方法，包括如下步骤：(1)在金纳米笼的悬浮液中加入Pdda溶液，室温振荡过夜；(2)离心分离，加入罗丹明B溶液，室温振荡过夜；(3)向上述溶液中加入ATP核酸适体溶液，室温振荡过夜，离心分离，用PBS缓冲溶液稀释后即制得基于静电作用修饰的纳米荧光探针。