[发明专利]一种酶解修饰的铜藻多糖及其应用

摘要

一种酶解修饰的铜藻多糖及其应用，所述酶解修饰的铜藻多糖的制备方法包括：(1)铜藻多糖微波提取，得到多糖粗提液；(2)分级醇沉：取多糖粗提液，先后在最终乙醇体积分数为30～40％和55～65％的条件下进行沉淀操作，得到SHP60粗多糖组分；(3)SHP60粗多糖组分经脱色、脱蛋白得到SHPA多糖；(4)SHPA多糖用葡聚糖酶酶解，得到酶解产物；(5)酶解产物用DEAE‑Sepharose Fast Flow离子柱层析系统进行离子柱层析，洗脱液经浓缩、过滤得到滤液；(6)步骤(5)所得滤液用Sephadex G‑25凝胶层析系统进行凝胶柱层析，收集不含盐的多糖部分，浓缩，冷冻干燥得到酶解修饰的铜藻多糖。所述酶解修饰的铜藻多糖可用于制备抗氧化剂、吸湿剂和保湿剂。

主权项

1.一种酶解修饰的铜藻多糖，其制备方法包括：(1)铜藻多糖微波提取：铜藻粉末用95％乙醇进行微波提取，95％乙醇的加入体积以铜藻粉末的质量计为10～20mL/g，微波处理条件为：微波功率400～600W，温度为50～90℃，微波时间为10～30min，提取结束后经冷冻离心分离得到多糖粗提液；(2)分级醇沉：取多糖粗提液，在最终乙醇体积分数为30～40％的条件下进行沉淀操作，冷冻离心得到沉淀a和上清液a；取上清液a在最终乙醇体积分数为55～65％的条件下进行沉淀操作，沉淀完全后经冷冻离心得到沉淀b和上清液b，沉淀b经水溶、蒸发、冷冻干燥得到SHP60粗多糖组分；(3)SHP60粗多糖组分经大孔树脂脱色、Sevage试剂脱蛋白得到SHPA多糖；(4)在pH4.5～5.5的HAc‑NaAc缓冲液体系中，SHPA多糖和葡聚糖酶于45～55℃进行酶解反应0.5～4h，终止反应后酶解反应液采用孔径大小为500Da规格的透析袋进行流水透析，透析液经浓缩、冷冻干燥得到酶解产物；其中，SHPA多糖与葡聚糖酶的投料质量比为1：0.5～2，所述葡聚糖酶在所述缓冲液体系中的质量浓度为0.3‑0.4％；(5)酶解产物配成水溶液用0.45μm微滤膜过滤，所得滤液用DEAE‑Sepharose Fast Flow离子柱层析系统进行离子柱层析，上样流速为1～2mL/min，分别以蒸馏水、0.1～0.4mol/L NaCl水溶液进行洗脱，洗脱流速为2～4mL/min，选定最大洗脱峰对应的洗脱液，浓缩、用0.45μm微滤膜过滤得到滤液；(6)步骤(5)所得滤液用Sephadex G‑25凝胶层析系统进行凝胶柱层析，上样流速为1～3mL/min，以蒸馏水进行洗脱，洗脱流速为2～4mL/min，以硝酸银指示剂检测洗脱液中是否脱盐完全并收集不含盐的多糖部分，浓缩，冷冻干燥得到酶解修饰的铜藻多糖。