[发明专利]应用于污水处理中的复合光合细菌制剂及其制备方法

摘要

本发明提供了一种应用于污水处理中能快速降解硫化氢，氨态氮与COD的复合光合细菌制剂及其制备方法。采用紫硫光合细菌中的桃红荚硫菌菌种与紫色非硫光合细菌中的沼泽红假单胞菌菌种经种子活化培养，种子培养，厌氧发酵罐光照培养等培养步骤，得到桃红荚硫菌与沼泽红假单胞菌的高浓度复合光合细菌制剂，该复合光合细菌制剂可以在污水处理中快速高效降解水体中硫化氢，氨态氮与COD。本发明提供了一种桃红荚硫菌与沼泽红假单胞菌两种菌混合培养，生长速度快，菌体含量高，培养时间短，能快速降解污水中硫化氢，氨态氮与COD的复合光合细菌制剂的制备方法。

主权项

应用于污水处理中的复合光合细菌制剂，其特征在于：采用紫硫光合细菌中的桃红荚硫菌菌种与紫色非硫光合细菌中的沼泽红假单胞菌菌种经种子活化培养，种子培养，厌氧发酵罐光照培养等培养步骤所得的；复合光合细菌制剂的制备方法在于按以下步骤进行培养：A、桃红荚硫菌半固体种子活化培养：将桃红荚硫菌种穿刺在半固体桃红荚硫菌培养基中，25‑30℃光照培养7‑10天，待穿刺的菌线变红并长出菌苔，即可为活化的桃红荚硫菌种；B、沼泽红假单胞菌平板活化：将沼泽红假单胞菌菌种在平板上划线活化，温度25‑35℃活化培养3‑5天，挑取大个菌落作为活化种子；C、桃红荚硫菌种子培养：将活化的菌种接种至桃红荚硫菌种子液体培养基中，温度25‑35℃，光照强度为1000‑3000lux，光照厌氧培养7‑10天，检测种子的OD650≥1.2，活菌数≥6亿cfu/ml即为种子培养液；D、沼泽红假单胞菌种子培养：将挑取大个沼泽红假单胞菌菌落作为活化种子接种到沼泽红假单胞菌种子培养基中，温度25‑35℃，光照强度为1000‑3000lux，光照静置培养3‑5天，检测种子的OD660≥1.2，活菌数≥10亿cfu/ml即为种子培养液；E、发酵培养：将桃红荚硫菌种子培养液与发酵培养基以1：3‑1：5的接种量接种，同时将沼泽红假单胞菌种子培养液与发酵培养基按1：10‑1：20的接种量接入，在光照培养罐中厌氧培养4‑6天，培养温度25‑35℃，光照强度为1000‑4000lux，搅拌速度为120转/分钟，待检测其OD650≥7，活菌数≥60亿cfu/ml，其中桃红荚硫菌菌浓度不低于25亿cfu/ml，沼泽红假单胞菌菌浓度不低于30亿cfu/ml，即可放罐，灌装，包装成品；所述的半固体桃红荚硫菌培养基为：氯化铵0.4‑1.2g/L，磷酸二氢钾0.5‑1g/L，二水氯化钙0.05‑0.2g/L，氯化镁0.1‑0.5g/L，醋酸钠2‑10g/L，苹果酸钠0.5‑1.5g/L，九水硫化钠0.1‑1g/L，琼脂8‑10g/L，氯化钠0.5‑4g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调pH至7.0‑7.2，其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌；所述的桃红荚硫菌种子液体培养基为：氯化铵0.4‑1.2g/L，磷酸二氢钾0.5‑1g/L，二水氯化钙0.05‑0.2g/L，氯化镁0.1‑0.5g/L，醋酸钠2‑10g/L，九水硫化钠0.1‑1g/L，氯化钠0.5‑4g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调pH至7.0‑7.2，其中九水硫化钠先配制成0.1g/mL单独灭菌；所述的沼泽红假单胞菌种子液体培养基为:氯化铵0.8‑1.2g/L，磷酸二氢钾0.5‑1g/L，二水氯化钙0.05‑0.2g/L，氯化镁0.1‑0.5g/L，醋酸钠2‑10g/L，碳酸钠1‑3g/L，氯化钠1‑2g/L，酵母膏0.5‑1.5g/L，121℃灭菌15分钟，用灭菌醋酸调pH至7.0‑7.2；所述的沼泽红假单胞菌平板固体培养基为种子液体培养基加入20g/L的琼脂形成的；所述的发酵培养基为：氯化铵1g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，二水氯化钙0.1g/L，氯化镁0.2g/L，醋酸钠6g/L，硫代硫酸钠2g/L，酵母膏0.5g/L，氯化钠2g/L，121℃灭菌15分钟，用醋酸调pH至7.0；所述桃红荚硫菌菌种保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，编号为CGMCC NO.10344。