[发明专利]一种欧李组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种欧李组培快繁方法，欧李（Cerasus?humilis）为蔷薇科樱桃属多年生落叶矮小灌木，是世界上最矮小的木本果树，也是我国特有的果药兼用野生树种。植物组织培养的方法具有繁殖系数高、周期短、成本低等特点，是欧李快速繁殖的最佳方式。本发明以欧李带腋芽茎段为外植体，经过诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等步骤获得了欧李离体再生植株，建立了欧李再生体系，为今后工厂化育苗及驯化栽培奠定坚实的基础。

主权项

一种欧李组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：（1）外植体消毒：欧李枝条带回实验室，自来水冲去表面灰尘后置于饱和的洗衣粉水中浸泡20～40min，用软毛刷彻底洗去灰尘后，放在流水下冲洗?2～3?h，冲净材料表面上残留的洗衣液，在超净工作台上先置于?70%～75%?的酒精中浸泡?30～60s，迅速用无菌水漂洗?2～5?次，然后用?0.1%?的升汞溶液消毒处理?6～15?min，注意将外植体完全浸泡在升汞中，消毒后用无菌水冲洗?4～7次，每次冲洗1～3min，无菌滤纸吸干外植体表面残留水分后备用；（2）诱导培养：将经步骤（1）处理后的外植体剪成带有?1～2?个腋芽、长度约为?1～2cm?的茎段，切掉与消毒液接触的切口部分后接种于诱导培养基中进行丛生芽诱导,接种后置于每天光照12～16小时，光照强度为2000～4000lx，置于培养温度为18～22℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养30天后统计萌动率；（3）增殖培养：将步骤（2）茎段腋芽诱导得到的萌枝剪切成1～2cm长的茎段并接种到增殖培养基进行继代增殖培养以得到更多的萌条,接种后置于每天光照14～16小时，光照强度为3000～5000lx，培养温度为15～20℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养25天后以不定芽长度≥1.0cm为有效芽统计增殖倍数；（4）生根培养：经步骤（3）继代3～5次后，选取健壮、生长势相对一致的试管苗接种至生根培养中诱导生根,接种后置于每天光照14～16小时，光照强度为3000～5000lx，培养温度为15～20℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养25天后统计生根率及平均生根数；（5）炼苗移栽：选取经生根培养后,根系发达且植株生长健壮的组培苗进行炼苗移栽,首先洗去组培苗基部附着的琼脂,之后将其移栽到事先浇透由草炭土:腐殖土:珍珠岩=2:1:1组成的混合基质中,之后向小苗进行喷雾,搭建简易塑料拱棚,保证棚内空气相对湿度达100%，覆盖塑料薄膜,以保证炼苗期间棚内的湿度,之后逐渐掀膜通风透光并注意棚内的湿度,移栽20天后统计移栽成活率。