[发明专利]一种HLA-DQB1基因分型的组特异性引物PCR-SBT方法及试剂有效
申请号: | 201510111237.1 | 申请日: | 2015-03-13 |
公开(公告)号: | CN104894230B | 公开(公告)日: | 2018-06-12 |
发明(设计)人: | 何吉;朱发明;和艳敏;章伟;吕杭军 | 申请(专利权)人: | 浙江省血液中心 |
主分类号: | C12Q1/6881 | 分类号: | C12Q1/6881;C12N15/11 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人: | 刘晓春 |
地址: | 310006 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供一种用于HLA‑DQB1基因分型的组特异性引物PCR‑SBT试剂,它由用于扩增的6对组特异性引物和用于测序分析的4条寡核苷酸测序引物组成;本发明还提供应用上述试剂的HLA‑DQB1基因分型的组特异性引物PCR‑SBT方法,本发明所提供的试剂和方法可作为一种独立的、应用广泛的鉴定方法,能成功解决HLA‑DQB1位点的准确分型鉴定问题,有利于提高造血干细胞移植供受者HLA配型的准确性,从而选择更合适的移植供者,降低移植过程中的排斥反应,这对于进一步提高器官移植的成功率和生存率具有重要的意义。 | ||
搜索关键词: | 基因分型 特异性引物PCR 特异性引物 造血干细胞移植 生存率 移植 测序分析 测序引物 分型鉴定 寡核苷酸 器官移植 扩增 位点 成功率 应用 排斥 成功 | ||
【主权项】:
一种HLA‐DQB1基因分型的组特异性引物PCR‐SBT试剂,其特征在于:所述试剂由用于扩增HLA‐DQB1不同等位基因的6对组特异性引物和用于测序分析的4条寡核苷酸测序引物组成;所述用于扩增的6对组特异性引物为:(1)扩增HLA‐DQB1*02组的特异性引物DQB1*02F:5'‐CTCGTCATTCCCTTGAACTG‐3'DQB1*02R:5'‐AACCACCGGACTTTGATCTG‐3',(2)扩增HLA‐DQB1*03:01组的特异性引物DQB1*0301F:5'‐TCAAAAGCTTGTGCTCTTTCAG‐3'DQB1*0301R:5'‐CAGTCCCTCCGAGCTATCAG‐3',(3)扩增除HLA‐DQB1*03:01外的HLA‐DQB1*03组和HLA‐DQB1*04组的特异性引物DQB1*04F:5'‐GATGAGGTGAGCACAGTCGG‐3'DQB1*04R:5'‐CTCCGAGCTATCAGGACTGG‐3',(4)扩增HLA‐DQB1*05组的特异性引物DQB1*05F:5'‐ACAGCAGGATTTGTCATTTCA‐3'DQB1*05R:5'‐GTCCTGTCTCCTCGCACTTC‐3',(5)扩增HLA‐DQB1*06:01组的特异性引物DQB1*0601F:5'‐GGAAATACAAGGCAGCAATGA‐3'DQB1*0601R:5'‐CCTGCTGAGGAGCTGAAGTC‐3',(6)扩增除HLA‐DQB1*06:01外的HLA‐DQB1*06组的特异性引物DQB1*0602F:5'‐CAAGACTGCCTGGACTTAGG‐3'DQB1*0602R:5'‐AGGACTGGGATTCAGAGCAA‐3';所述4条寡核苷酸测序引物序列如下:DQB1‐2F:5'‐GGCCSGTGATTCCYCGCAG‐3',DQB1‐2R:5'‐GGKCRACSMCGCTCACCTC‐3',DQB1‐3F:5'‐CTTTYCCTGTCTGTTACTGC‐3',DQB1‐3R:5'‐GGCCCAYARTAACAGAAACTC‐3'。
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