[发明专利]基于图像分析的贝类麻痹性毒素检测方法

摘要

本发明公开了一种基于图像分析的贝类麻痹性毒素检测方法，该方法首先进行样品前处理，制备贝类麻痹性毒素的待测样品溶液；然后配置标准品溶液，使用试纸条；之后通过检测图像采集，图像分析，计算检测试纸条颜色图像RGB空间中G分量的像素值，再通过最小二乘法拟合出试纸条检测贝类麻痹性毒素的标定曲线；通过分析待测样品溶液在试纸条上的控制线与检测线的子图像G分量像素值，带入标定曲线，进而计算出待测样品溶液贝类麻痹性毒素浓度。本发明实现了贝类麻痹性毒素的定量检测，具有操作步骤简单，快速检测，能够适应现场检测等优点。

主权项

一种基于图像分析的贝类麻痹性毒素检测方法，该方法在贝类麻痹性毒素检测系统上实现，所述贝类麻痹性毒素检测系统包括：智能移动设备、图像采集固定架和试纸条；其中，图像采集固定架的一侧固定智能移动设备，另一侧固定试纸条；智能移动设备的后摄像头对准试纸条，从而采集试纸条的图像；该方法包括以下步骤：（1）样品前处理，制备贝类麻痹性毒素的待测样品溶液，具体包括以下子步骤：（1.1）取贝类生物，除去贝壳，用双蒸水洗净贝肉后均质器均质；（1.2）称取10g 均质后的样品加入10ml提取液，得到混合溶液，所述提取液由异丙醇和乙酸按体积比5：2混合组成；（1.3）室温下，将步骤1.2得到的混合溶液振荡均匀并过滤除杂，得到滤液；（1.4）取100μl滤液作为待测样品溶液；（2）试纸条标准样品加样，具体包括以下子步骤：（2.1）从标准样品溶液中取出100μl，加入pH=3.0的酸性水溶液配成2μg/ml的样品储液；所述标准样品溶液为浓度为100μg/ml的贝类麻痹性毒素；（2.2）将步骤2.1制备好的2μg/ml的样品储液分别用缓冲液配制成浓度为1000ng/ml、600ng/ml、500ng/ml、400ng/ml、300ng/ml、200ng/ml、100ng/ml、0ng/ml的标准样品检测液，每种浓度的标准样品检测液的体积均为200μl；所述缓冲液为贝类前处理液；（2.3）检查试纸条到期日期及内置干燥剂袋，若干燥剂袋为蓝色，则试纸条可用，若为粉红色，则不能用于检测；（2.4）每种浓度的标准样品检测液均取100μl，分别滴于试纸条上的加样垫；（2.5）将试纸条置于室温下，静置30‑60min后；（3）确定试纸条检测贝类麻痹性毒素的标定曲线，将步骤（2）中的试纸条显色完毕后固定在图像采集固定架上采集图像进行检测，记录数据并进行分析处理，具体包括以下子步骤：（3.1）切割出每个试纸条上控制线与检测线的子图像，子图像的像素范围为10×10；（3.2）将子图像转换至颜色空间RGB，提取子图像中每个像素的G分量，并计算子图像像素G分量的平均值；（3.3）根据最小二乘法拟合曲线算法，拟合出G分量关于标准样品检测液浓度的标定曲线，即试纸条检测贝类麻痹性毒素的标定曲线；（4）检测未知浓度的样品溶液贝类麻痹性毒素浓度：将步骤1.4得到的待测样品溶液加入试纸条上的加样垫，重复步骤2.5‑步骤3.2，得到在该待测样品溶液浓度下的子图像的G分量平均值，带入步骤3.3得到的试纸条检测贝类麻痹性毒素的标定曲线，计算出待测样品溶液的贝类麻痹性毒素浓度。