[发明专利]一种维氏气单胞菌渔用注射疫苗的制备及使用方法

摘要

本发明公开了一种维氏气单胞菌渔用注射疫苗的制备及使用方法，维氏气单胞菌单个菌落普通肉汤中28℃培养12h；用无菌枪头吸取涂布于普通平板，4h后用无菌生理盐水洗下维氏气单胞菌；用无菌生理盐水稀释维氏气单胞菌至2.5×10⁹CFU/mL；加入0.2％的甲醛溶液，在28℃条件下恒温灭活24h，8000r/min离心洗涤3次，每次5min，再用无菌生理盐水稀释维氏气单胞菌至1×10⁸CFU/mL；将制得的维氏气单胞菌灭活疫苗采用腹腔注射的方法对健康鱼类进行免疫注射，大小规格为40-60g的鱼，接种量为每尾注射0.2mL疫苗。本发明的有益效果是该疫苗能有效预防维氏气单胞菌感染鱼类，免疫效果好。

主权项

一种维氏气单胞菌渔用注射疫苗的制备方法，其特征在于按照以下步骤进行：步骤1：挑取维氏气单胞菌形成的单个菌落，接种培养于普通肉汤培养基中，形成菌液，28℃培养12h，扩大培养维氏气单胞菌到最高峰值；步骤2：之后用无菌枪头吸取0.2mL菌液涂布于普通平板上培养，4h后用无菌生理盐水洗下维氏气单胞菌；步骤3：用麦氏比浊法测定维氏气单胞菌浓度，用无菌生理盐水稀释维氏气单胞菌浓度至2.5×10⁹CFU/mL；步骤4：加入0.2％的甲醛溶液，在28℃条件下恒温灭活24h，8000r/min离心洗涤3次，每次5min，再用无菌生理盐水将维氏气单胞菌浓度稀释至1×10⁸CFU/mL，即为维氏气单胞菌灭活全菌苗；置于4℃的冰箱中保存备用。