[发明专利]CRISPR/Cas9核酸内切酶体系的腺相关病毒载体构建及其用途有效
| 申请号： | 201510114406.7 | 申请日： | 2015-03-16 |
| 公开（公告）号： | CN106032540B | 公开（公告）日： | 2019-10-25 |
| 发明（设计）人： | 宋保亮;谢畅 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/864 | 分类号： | C12N15/864;C12N15/55;C12N7/01 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200031 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及CRISPR/Cas9核酸内切酶体系的腺相关病毒载体构建及其用途。本发明人通过缩小优化Cas9表达元件，制备了具有组织细胞广谱表达的Cas9蛋白的AAV表达载体，首次实现将整个表达元件和Cas9编码序列包装进AAV病毒。基于AAV病毒包装的特性，只需更换包装衣壳质粒，即可将此Cas9载体包装成不同血清型的AAV病毒。本发明获得的病毒可以有效地实现组织靶向表达及DNA编辑。 | ||
| 搜索关键词： | crispr cas9 核酸 内切酶 体系 相关 病毒 载体 构建 及其 用途 | ||
【主权项】：
1.一种表达Cas9的重组腺相关病毒载体，其特征在于，该载体包括如下操作性连接的序列元件：5’末端反向重复序列，CMV启动子序列，核定位信号1序列，Cas9编码核酸序列，核定位信号2序列，miniPolyA序列和3’末端反向重复序列；其中所述的Cas9编码核酸序列如SEQ ID NO:1中第964～5064位所示；所述的核定位信号1序列如SEQ ID NO:1中第913～963位所示；所述的核定位信号2序列如SEQ ID NO:1中第5065～5112位所示。
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