[发明专利]一种葡萄胚性愈伤组织的诱导和培养方法

摘要

本发明提供一种葡萄胚性愈伤组织的诱导和培养方法，它包括以下步骤：取葡萄植株的嫩梢为外植体，经过修剪、消毒洗涤，得到无菌葡萄茎段；将无菌葡萄茎段置于葡萄愈伤组织诱导培养基诱导培养，再转接继代两次，得到葡萄愈伤组织，葡萄愈伤组织诱导培养基含6‑苄氨基腺嘌呤1.0‑2.5mg/L、a‑萘乙酸0.1‑0.5mg/L；将葡萄愈伤组织转接至胚性愈伤组织培养基培养，得到胚性愈伤组织，胚性愈伤组织培养基含2,4‑二氯苯氧乙酸0.5‑1.5mg/L、6‑苄氨基腺嘌呤0.5‑2.0mg/L、a‑萘乙酸0.05‑0.5mg/L。该方法以葡萄幼嫩茎段为外植体进行诱导，有效解决了葡萄胚性愈伤组织诱导难、诱导率低的问题。

主权项

一种葡萄胚性愈伤组织的诱导和培养方法，其特征在于包括以下步骤：(1)外植体的选取：取葡萄植株的嫩梢为外植体，经过修剪、消毒洗涤，得到无菌葡萄茎段；(2)愈伤组织的诱导培养：将无菌葡萄茎段置于葡萄愈伤组织诱导培养基上进行诱导培养，得到初级培养葡萄愈伤组织；将得到的初级培养葡萄愈伤组织再转接至葡萄愈伤组织诱导培养基进行继代培养两次，得到增殖后的葡萄愈伤组织，所述葡萄愈伤组织诱导培养基是以MS培养基为基础培养基，并添加蔗糖30g/L、琼脂7g/L、聚乙烯吡咯烷酮1.0‑3.0g/L、6‑苄氨基腺嘌呤1.0‑2.5mg/L、a‑萘乙酸0.1‑0.5mg/L，pH值5.8；(3)胚性愈伤组织的培养：将得到的葡萄愈伤组织转接至胚性愈伤组织培养基中进行培养，得到胚性愈伤组织，所述胚性愈伤组织培养基以MS培养基为基础培养基，并添加蔗糖30g/L、琼脂7g/L、聚乙烯吡咯烷酮1.0‑3.0g/L、2,4‑二氯苯氧乙酸0.5‑1.5mg/L、6‑苄氨基腺嘌呤0.5‑2.0mg/L、a‑萘乙酸0.05‑0.5mg/L，pH值5.8。