[发明专利]一种磁性纳米材料固定化阿魏酸酯酶的方法有效
| 申请号： | 201510126901.X | 申请日： | 2015-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN104745568B | 公开（公告）日： | 2018-06-19 |
| 发明（设计）人： | 张松;刘新利;和富明 | 申请（专利权）人： | 齐鲁工业大学 |
| 主分类号： | C12N11/14 | 分类号： | C12N11/14 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 张贵宾 |
| 地址： | 250353 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种磁性纳米材料固定化阿魏酸酯酶的方法，包括Fe2O3固定化载体磁性纳米材料的制备；固定化载体磁性纳米材料与阿魏酸酯酶溶液混合；在磁力设备上制备固定化阿魏酸酯酶。本发明制备工艺简单，反应条件温和，重复再生利用率高，制备的固定化阿魏酸酯酶保持等量游离酶活的90%以上，且热稳定性提高，在40℃恒温下120h，固定化阿魏酸酯酶的酶活能保存80%以上。 1 | ||
| 搜索关键词： | 阿魏酸酯酶 固定化 磁性纳米材料 制备 固定化载体 发明制备工艺 再生利用率 磁力设备 反应条件 热稳定性 溶液混合 游离酶 等量 酶活 保存 重复 | ||
【主权项】：
1.一种磁性纳米材料固定化阿魏酸酯酶的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）将FeCl3·6H2O和FeSO4·7H2O溶于去氧蒸馏水中，氮气保护下搅拌，待混合物完全溶解后加入氨水，快速搅拌30min，将反应体系放在梯度磁场中静置，黑色物质沉于底部，得到Fe3O4磁性纳米材料，将Fe3O4磁性纳米材料用去氧蒸馏水洗涤5‑6次，调pH至2.5‑3.0，加热氧化，得到Fe2O3固定化载体磁性纳米材料；固定化载体磁性纳米材料颗粒直径为10‑40nm；（2）将固定化载体磁性纳米材料与用缓冲液配置的阿魏酸酯酶溶液混合，磁性纳米材料与阿魏酸酯酶的质量比为0.0125‑0.125，调整混合溶液的pH至4‑9，温度为20‑50℃，轻摇振荡2‑12h；阿魏酸酯酶溶液浓度为0.5‑2mg/mL，pH为6‑8；（3）将混合液放置在磁力设备上静置处理，上清液用于酶蛋白测定，沉淀物用去离子水洗涤数次，直至上清液中没有游离酶为止，获得固定化阿魏酸酯酶，4℃保存备用。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于齐鲁工业大学，未经齐鲁工业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201510126901.X/，转载请声明来源钻瓜专利网。
