[发明专利]用于19种高危型人乳头瘤病毒(HPV)的检测试剂盒、检测体系及方法

摘要

本发明公开了一种检测人乳头瘤病毒(HPV)19种高危型的检测试剂盒、检测体系和方法，其中19种高危型HPVs包括HPV16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、70、73、82；本发明采用多条通用引物对目的片段进行扩增，利用特异的荧光探针对扩增片段进行实时检测，采用通用引物，减少了体系引物用量和体系的复杂性，节约了成本，10条引物共同作用将所有高危型检测出来；20条特异性探针对各型别进行区分。本发明在同一反应管中即可检测19种高危型HPV,灵敏度高，特异性强，操作简便快捷，同时，对患者而言，节省了筛查费用。

主权项

一种用于检测19种高危型人乳头瘤病毒的试剂盒，其特征在于，包括：1)引物通用 HPV‑F1TGCCTGGGGYAATCAGTTATTTGTTAC SEQ ID NO:1通用 HPV‑R3CCTCTGCCATGICKAATATATTSCTTAA SEQ ID NO:2通用 HPV‑R5CCTCTGCCATGYCKAATATAYTSCTTAA SEQ ID NO:3通用 HPV‑R6CCTCTGCCATGYCKAATATACTSCTTAA SEQ ID NO:4HPV39 HPV‑390‑F1TGCCTGGGGCAATCAGTTATTTGTTAC SEQ ID NO:5HPV53 HPV‑530‑R1CCTCTGCCATGTCTAAGGTATTCCTTAA SEQ ID NO:6HPV51 HPV‑510‑R CCTCTGCCATGACTAACCTATTCCTTAA SEQ ID NO:7HPV16 HPV‑160‑R CCTCTGCCATGYCTAATATAYTSCTTAA SEQ ID NO:8HPV18 HPV‑180‑F TGCCTGGCATAATCAATTATTTGTTAC SEQ ID NO:9HPV52 HPV‑520‑R CCTCTGCCATGTCTAATATATTCCTTAA SEQ ID NO:10；2)探针HPV16 HPV16‑P1‑C CGCAGTACAAATATGTCATTATGTGCTGCC SEQ ID NO:11HPV18 HPV18‑P3‑C TTAACAATATGTGCTTCTACACAGTCTCCTGTACC SEQ ID NO:12HPV26 HPV26‑P1‑F GTTGATACCACCCGCAGTACTAACCTTACC SEQ ID NO:13HPV31 HPV31‑P1‑F CCAATATGTCTGTGTGTGCTGCAATTGC SEQ ID NO:14HPV33 HPV33‑P1 CCACTCGCAGTACTAATATGACTTTATGCACAC SEQ ID NO:15HPV35 HPV35‑P1‑F GTCTGTGTGTTCTGCTGTGTCTTCTAGTGACAG SEQ ID NO:16HPV39 HPV39‑P1‑F CCTGTCTACCTCTATAGAGTCTTCCATACCTTCTAC SEQ ID NO:17HPV45 HPV45‑P1 TTATGTGCCTCTACACAAAATCCTGTGCC SEQ ID NO:18HPV51 HPV51‑P1 CTATTAGCACTGCCACTGCTGCAGTTTCC SEQ ID NO:19HPV52 HPV52‑P1‑F CAGTTGTAGATACCACTCGTAGCACTAACATGACTTTA SEQ ID NO:20HPV53 HPV53‑P1‑F CATGACTCTTTCTGCAACCACACAGTCTATG SEQ ID NO:21HPV56 HPV56‑P1 CTGCTACAGAACAGTTAAGTAAATATGATGCACG SEQ ID NO:22HPV58 HPV58‑P1 GATACCACTCGTAGCACTAATATGACATTATGCAC SEQ ID NO:23HPV59 HPV59‑P1 CAGCACCAATCTTTCTGTGTGTGCTTC SEQ ID NO:24HPV66 HPV66‑P1‑F CTACCAGAAGTACCAACATGACTATTAATGCAGC SEQ ID NO:25HPV68 HPV68‑A‑P2‑F CGTTGTGGATACAACGCGCAGTACTAATT SEQ ID NO:26HPV68 HPV68‑B‑P2‑F TATTTCTTACTGTTGTGGATACCACTCGCAGTACC SEQ ID NO:27HPV70 HPV70‑P1‑F ATTGTCTGCCTGCACCGAAACGG SEQ ID NO:28HPV73 HPV73‑P1‑F GTGTAGGTACACAGGCTAGTAGCTCTACTACAACG SEQ ID NO:29HPV82 HPV82‑P3‑F CACTGCTGTTACTCCATCTGTTGCACAA SEQ ID NO:303)内标E‑Ex4‑F1 TCAGCAACAACCCTGCCCTG SEQ ID NO:31E‑Ex4‑R1 GAAGGTCTTGGTGGACCCGTC SEQ ID NO:32E‑Ex4‑P1 TGGGACGGGACACGTTGCACCTCT SEQ ID NO:33。