[发明专利]一种用废旧塑料桶培养褶皱臂尾轮虫的方法

摘要

本发明公开了一种用废旧塑料桶培养褶皱臂尾轮虫的方法，属水产养殖领域。本技术核心是先用平底圆形烧瓶混合培养3种海洋微藻，然后在混合藻液中添加部分牛粪，兔粪，面包酵母粉，碎鱼肉，奶粉，酱油糟，鸡粪等制成轮虫饵料液，投放到事先准备好的装有培养液的废旧塑料桶中充气培养褶皱臂尾轮虫。本技术所生产轮虫饵料配方科学、合理，营养全面，轮虫生长快，体质健壮，产量高；采用废旧塑料桶培养轮虫，洗刷方便，透光性好，可重复使用，不易污染，废物利用，节约资金。

主权项

一种用废旧塑料桶培养褶皱臂尾轮虫的方法，其特征在于步骤如下：步骤1饵料微藻的培养按重量份计培养液配方为NaNO30.5份，KH2PO30.005份，1％的FeC6H5O7溶液0.2份，维生素B10.0002份，维生素B120.00002份，人尿0.8份，海泥抽出液3份，含氨25‑28％的氨水1份，多肽尿素0.2份，硫酸铵0.1份，硫酸钾0.5份，氯化钾0.8份，异丁叉二脲0.3份，草酰胺0.4份，磷酸镁铵0.08份，聚磷酸铵0.2份，硅酸钠0.8份，多胺0.0005份，脱落素0.02份，碳酸氢钠5份，土壤浸出液1.2份，麦饭石粉0.1份，煮沸冷却后的磁化海水1000份；取一个1500毫升的平底圆形烧瓶，洗刷干净，用蒸馏水润洗3遍，加入上述培养液800毫升，用无敌害生物污染、生活力强、生长旺盛、颜色正常、无明显沉淀的眼点小球藻，湛江等鞭金藻，微绿球藻藻种分别接种，进行混合培养；接种密度：眼点小球藻5万个细胞/毫升，湛江等鞭金藻4万个细胞/毫升，微绿球藻8万个细胞/毫升；然后用橡胶塞塞住瓶口，橡胶塞上打上两个孔，插入两根细玻璃管，管径4‑6毫米，一根较长，用来充气，插入藻液，接近瓶底，另一根较短，两端露出橡胶塞即可，用来排气，充气管一端与空压机相连，充气量3‑5升/分钟，保持藻细胞悬浮不下沉即可；将此圆形烧瓶放入微藻培养室中进行培养，共培养10天，培养过程的第1‑3天，设置温度18℃，光照强度2500lux，光暗周期L∶D＝12h∶12h，即每天12小时光照，12小时黑暗；培养过程的第4‑6天，设置温度21℃，光照强度5000lux，光暗周期L∶D＝14h∶10h，即每天14小时光照，10小时黑暗；培养过程的第7‑10天，调节温度至25℃，光照强度9000lux，光暗周期L∶D＝16h∶8h；到第7天，添加新鲜培养液80毫升，以补充营养盐的消耗；到第10天，微藻密度之和可达到3000万个细胞/毫升，倒出藻液的一半，余下的一半作为种用，添加新鲜培养液，继续培养，即采用所谓半连续培养；到第13天，再倒出藻液的一半，另一半作为种用，添加新鲜培养液，继续培养，到第16天，再倒出藻液的一半，另一半作为种用，添加新鲜培养液，继续培养，到第19天，停止培养，全部采收；步骤2轮虫饵料液的制备以步骤1采收的藻液作为主要成分，添加部分辅助成分，制成轮虫的饵料液；具体是：藻液1000份，牛粪2份，兔粪1份，面包酵母粉0.5份，碎鱼肉0.8份，芝麻渣0.1份，奶粉0.3份，酱油糟0.6份，鸡粪0.8份，大蒜泥0.3份，蜂蜜渣0.1份，猪血粉0.4份；充分搅拌均匀，用网目孔径为100微米的尼龙筛绢过滤，弃渣滓，将滤液用超声器产生的超声波处理3‑4分钟，目的是用超声波将大颗粒饵料打碎，变成小颗粒，以利于轮虫吞食，自然发酵48小时，稀糊状的轮虫饵料液制备完成，即可用于投喂轮虫；步骤3轮虫的培养取一25升的废旧塑料桶，白色透明，以利透光，用100ppm孔雀石绿溶液浸泡5小时，后用洗洁精、试管刷洗刷干净，再用蒸馏水润洗3遍，加入12升煮沸冷却磁化海水，加入2升步骤2所述稀糊状的轮虫饵料液，摇匀，选择活泼、健康、无敌害生物的褶皱臂尾轮虫接种，接种密度25‑45个/毫升；从第2天开始，每天补加步骤2所述稀糊状的轮虫饵料液0.5升；温度控制在23‑26℃，光照1500‑2500lux，从桶口插入一根细玻璃管充气，玻璃管直径4‑6毫米；玻璃管通过乳胶管或塑料管与空气压缩机相连，气体成分和比例为V空气+V纯氧气＝99％+1％(体积比)；充气量4‑8升/分钟，充气量太大反而不利于轮虫的摄食和生活；将此塑料桶置于室内培养，空调控温，节能灯照明；培养到第12天，轮虫密度可达2000‑5000个/毫升，即可采收；步骤4轮虫的采收用10升的量筒取步骤3所述轮虫培养液，按每升培养液加小苏打NaHCO33.5克的量加入小苏打，搅拌均匀，静置沉淀24小时，由于培养液pH值的迅速升高和释放的热量，轮虫休克、昏迷，下沉到底部，弃上清液，得底部沉积的轮虫，然后用10％的乙酸溶液(体积比)中和、调节pH值至7.0‑8.2，摇匀，再沉淀24小时，弃上清液，得轮虫，即可用以投喂扇贝、鱼苗、对虾、梭子蟹经济动物；步骤1中所述FeC6H5O7(柠檬酸铁)较难溶解，加少量自来水在火炉上微热至80‑90℃，并不断搅拌至全部融化；步骤1中所述麦饭石粉系由麦饭石经粉碎机粉碎所得，粒径小于25微米；步骤1中所述人尿制备方法：取人尿1000毫升，三角烧瓶煮沸5分钟后，冷却备用；步骤1中所述土壤浸出液制备方法：取树林中上层土壤1000份，加蒸馏水1000份，再加NaOH 2.5份，加热，煮沸45分钟，冷却、沉淀12小时，弃沉渣，取上清液，滤纸过滤，滤液即为土壤浸出液；步骤1中所述海泥抽取液制备方法：取比较肥沃又不於黑的海泥，以1份泥加2份淡水，充分搅拌均匀，静置1‑2分钟，取上层泥浆于铝锅中，按每1000毫升泥浆加1克NaOH的量加入NaOH，煮沸25分钟；煮时需不断搅拌均匀，煮后冷却、静置24小时取上清液备用；步骤1中所述NaNO3，KH2PO3，FeC6H5O7，多肽尿素，硫酸铵，硫酸钾，氯化钾纯度均需化学纯级别；步骤1中培养微藻所用磁化水制作方法：海水煮沸后，冷却，流经磁化水器后，即为磁化水；磁化水器磁感应强度为0.3T，流量为3t/h，流速为0.2m/s；步骤3中培养轮虫所用磁化水用同样方法制得；步骤2中所述牛粪制备方法：取牛粪50公斤，加入麸皮3公斤，玉米面1公斤，自来水4升，充分搅拌，堆成圆锥状，自然发酵15天，后摊成薄层，阳光下暴晒4‑5天，粉碎机粉碎，粒径小于25微米即可；步骤2中所述超声波处理时间4‑5分钟，占空比0.7，超声强度250W/cm2；步骤2中所述兔粪和鸡粪需分别装入塑料袋自然发酵7‑9天，然后倒在水泥地上，摊成薄层，阳光下暴晒3‑5天，后用粉碎机打成粉末，粒径小于25微米即可。