[发明专利]一种栉孔扇贝幼体饵料的制作和投喂方法

摘要

本发明公开了一种栉孔扇贝幼体饵料的制作和投喂方法，属水产养殖领域。在栉孔扇贝育苗过程中，常发生因饵料不足导致苗种体质弱、成活率低。本发明技术核心是利用磁化水和蓝光培养4种海洋微藻并制成藻膏投喂栉孔扇贝幼苗，营养全面，扇贝幼虫生长快，体质健壮，成活率高；用磁化水培养微藻，藻体繁殖旺盛，颜色纯正，采用贮水罐培养微藻，洗刷方便，成本低，不易碰碎，可重复使用，不易污染；采用蓝光培养，微藻中EPA、DHA含量高；将藻液制成藻膏投喂，投喂量易控制，不污染水体，饵料可常年生产，占空间小，运输和储存方便。

主权项

1.一种栉孔扇贝幼体饵料的投喂方法，其特征在于具体步骤如下：(1)制作栉孔扇贝幼体饵料，具体步骤如下：步骤1微藻培养液的配制培养液成分配方重量比：丁烯叉二脲0.4份，草酰铵0.3份，聚磷酸铵0.01份，偏磷酸钾0.002份，磷酸二铵0.004份，氨化过磷酸钙0.005份，NH4NO30.8份，KH2PO40.004份，Na2SiO3·9H2O 0.02份，NaHCO30.8份，NH4VO30.02份，ZnSO4·7H2O 0.08份，Cr2(SO4)4·24H2O 0.02份，f/2微量元素溶液1.2份，维生素S‑3溶液0.8份，土壤浸出液0.4份，海泥抽取液0.6份，吲哚乙酸0.0001份，亚精胺0.002份，中草药浸出液0.5份，煮沸冷却磁化后的海水1000份；用体积比15％的乙酸溶液和重量比10％的NaOH溶液调节pH值至7.8‑8.2，装入三角烧瓶，放在摇床上摇匀混合15分钟；其中f/2微量元素溶液配方，按配制1000毫升溶液计：ZnSO4·4H2O 23毫克，MnCl2·4H2O 178毫克，CuSO4·5H2O 10毫克，FeC6H5O7·5H2O 3.9克，Na2MoO4·2H2O 7.3毫克，CoCl2·6H2O 12毫克，Na2EDTA 4.35克，蒸馏水1000毫升；维生素S‑3溶液配法：硫胺素盐酸盐50毫克，尼古丁酸10毫克，泛酸钙10毫克，对氨基苯甲酸1.0克，维生素H 0.1克，肌醇0.5克，叶酸0.2微克，胸间氮苯0.3克，蒸馏水1000毫升；步骤2微藻培养采用二级培养法培养，第一级培养：培养容器为20000毫升的细口玻璃瓶，工作体积12000毫升；洗刷干净后用煮沸冷却的消毒海水润洗3遍，瓶口用75％酒精拭擦消毒，加入步骤1所述培养液10000毫升，取无污染、纯种、处于指数生长期的娇柔塔胞藻，湛江叉鞭金藻，膜状舟形藻，异胶藻分别接种，接种密度娇柔塔胞藻6万细胞/毫升，湛江叉鞭金藻3万细胞/毫升，膜状舟形藻4万细胞/毫升，异胶藻8万细胞/毫升；用干净报纸和橡皮筋封瓶口，放进微藻培养室不充气培养，空调控温，日光灯管提供光源，每天摇瓶6次，每次5分钟，培养的前3天，光照强度设为3000lux，温度控制为18℃，光照周期为L∶D＝12h∶12h，即12小时光照，12小时黑暗；第4‑6天，光强设为6000lux，温度调节为21℃，光暗周期调至L∶D＝16h∶8h；到第7天，补充步骤1所述培养液1000毫升和蒸馏水500毫升，以补充消耗掉的营养盐和挥发的水分并稀释藻液；第7‑9天，调节温度至25℃，光照强度12000lux，光暗周期L∶D＝20h∶4h，即每天20小时光照，4小时黑暗；到第9天，藻细胞密度合计达2400万/毫升，即转入第二级培养；第二级培养：取两个1000升的白色卧式贮水桶，洗刷干净，加入200ppm的高锰酸钾溶液浸泡消毒3小时，用煮沸冷却海水冲洗3遍，每个桶加入步骤1所述培养液600升，第一级培养得到的藻液作为种子液按1∶8的体积比例接种，即8份培养液加入1份种子液；桶的盖子上分别打上2个孔，孔径10毫米，其中一个孔插入充气管，另一孔插入排气管，管的内径8毫米，第二个桶的充气管与第一个桶的排气管相连，这样充入的气体得到二次利用；第一个桶的充气管顶端连接一空气压缩机，充入混合气体，气体成分和体积比例为V空气∶V纯氧气∶V纯二氧化碳∶V纯氨气＝98∶0.8∶0.9∶0.3，充气量不宜太大，能让藻细胞悬浮不沉淀即可；将此二桶放入微藻培养室进行培养，室内空调控温，日光灯管提供光源，桶的外表面覆盖一层很薄的蓝色塑料薄膜，这样射入藻液的主要是蓝色光，有利于细胞内高不饱和脂肪酸EPA、DHA积累；每天用体积比15％的乙酸溶液和重量比10％的NaOH溶液调节pH值至7.8‑8.2；培养的前3天，光照强度设为6000lux，由于塑料桶壁的和薄膜的阻挡和吸收作用，实际到达藻液的光强约为3000lux，温度控制为18℃，光照周期为L∶D＝12h∶12h，即12小时光照，12小时黑暗；第4‑6天，光强设为12000lux，温度调节为21℃，光暗周期调至L∶D＝16h∶8h；到第7天，每个桶补充步骤1所述培养液25升和10升蒸馏水，以补充消耗掉的营养盐和挥发的水分并稀释藻液；第7‑9天，调节温度至26℃，光照强度18000lux，光暗周期L∶D＝21h∶3h，即每天21小时光照，3小时黑暗；到第9天，藻细胞密度合计可达2100万/毫升，停止培养，即可采收；步骤3微藻采收方法：将明矾、甲壳素、聚丙烯酰胺、硫酸亚铁按1∶1.5∶0.8∶0.4的质量比混合，充分搅拌、混合均匀制成复合沉淀剂，按1升藻液加入200毫克复合沉淀剂的量加入沉淀剂，充分搅拌、混合15分钟，静置、沉淀24小时，绝大多数藻细胞沉淀到底部，弃上清液，得底部牙膏状藻膏，装入食品用塑料薄膜袋，置于‑15℃冰箱冷冻保存，备用，即得到栉孔扇贝幼体饵料；(2)投喂方法栉孔扇贝幼虫的培养和投喂：当受精卵孵化至D形幼虫时，将幼虫转移至100L的玻璃鱼缸中进行培养，可自动充气和照明，市场有售，鱼缸为长方体或立方体，实际装水60L，采用煮沸消毒冷却后的磁化海水培养，幼虫密度为4‑8个/ml，不间断充气，充气量不宜太大，水体保持较高溶氧即可，充气管末端连一散气石，避免形成大气泡伤害扇贝幼虫；投喂所述的栉孔扇贝幼体饵料，第一天投喂量为2克/m3，分6次投喂，栉孔扇贝幼体饵料投喂量每天增加10％；具体投喂方法是：取栉孔扇贝幼体饵料2克，放在研钵中研碎，转入150毫升的三角烧瓶中，加入蒸馏水80毫升，充分摇匀，后均匀泼洒到培养容器中，然后均匀搅拌10分钟；换水1次/2天，换水量为总量的1/5‑1/3，换水时用网目大小为60微米的聚乙烯筛绢阻挡，以免幼虫随水流走；培养期间水温20‑23℃，相对密度1.019，光照强度1000‑1200lux；当眼点幼虫出现率为80％以上、大眼点率为40％以上开始投附着基棕绳帘，投放前棕绳帘要经过严格洗刷处理，投放时再用200ppm孔雀石绿浸泡12小时，采用先倒池后投附着基，幼虫培育期间连续微量充气；每4‑5天施链霉素4‑6毫克/升，投附着基后连续施2‑3天漂白粉消毒，每天一次，每次5‑8毫克/升；稚贝出池：当稚贝平均壳高达600微米时，开始出池下海保苗；步骤1中各种营养盐要按配方中提供的顺序加入，以免发生化学反应；步骤1中各种无机营养盐和维生素预先配成母液且置于4℃冰箱冷藏保存备用，放置时间不要超过30天；步骤1中所述土壤浸出液制备方法：取树林中上层土壤1000份，加蒸馏水1000份，再加NaOH 2.5份，加热，煮沸45分钟，冷却、沉淀12小时，取上清液，滤纸过滤，滤液即为土壤浸出液；步骤1中所述海泥抽取液制备方法：取比较肥沃又不於黑的海泥，以1份泥加2份淡水，充分搅拌均匀，静置1‑2分钟，取上层泥浆于铝锅中，按每1000毫升泥浆加1克NaOH的量加入NaOH，煮沸25分钟；煮时需不断搅拌均匀，煮后静置24小时取上清液备用；步骤1中所述NH4NO3，KH2PO4，Na2SiO3·9H2O，NaHCO3，NH4VO3，ZnSO4·7H2O化学药品纯度均需化学纯级别；步骤1中所述中草药浸出液组成和质量份数为：生地黄8份，防风5份，白芷7份，川芎14份，苍术6份，黄柏18份，玉竹16份，蒲公英10份，当归3份，橘皮6份，黄连5份，元参18份，金银花9份，丹参2份，连翘15份，车前草7份，蒸馏水48份；先浸泡45分钟，用砂锅煎煮，大火加热，烧开后小火煮沸15分钟后停止加热，冷却、静置8小时，取上清液用120目筛绢过滤，即得中草药浸出液，4℃冰箱保存，备用；步骤1中培养微藻所用磁化后的海水制作方法：海水煮沸后，冷却，流经磁化水器后，即为磁化后的海水；磁化水器磁感应强度为0.3T，流量为2t/h，流速为0.3m/s；步骤(2)投喂方法中培养扇贝幼虫所用磁化海水也是用同样的方法制得。