[发明专利]一种D‑乳酸氧化酶及其在D‑乳酸检测中的应用有效
| 申请号： | 201510135775.4 | 申请日： | 2015-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN104745544B | 公开（公告）日： | 2017-10-27 |
| 发明（设计）人： | 高超;盛彬彬;马翠卿;许平 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12Q1/26 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司37221 | 代理人： | 李健康 |
| 地址： | 250061 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种D‑乳酸氧化酶，该酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，为可溶性蛋白，辅因子为FAD，其最适温度为55℃，最适pH为8.0，在pH 7.0～9.0范围内具有60％以上的酶活；该酶能够以分子氧为直接电子受体催化D‑乳酸氧化生成丙酮酸和过氧化氢，当D‑乳酸浓度在0.1～1.3mmol/L范围内时，该酶催化生成的过氧化氢浓度与初始D‑乳酸浓度呈线性相关；该酶对D‑乳酸的表观Km和Vmax分别为3.62±0.53mmol/L和0.52±0.05U/mg，该酶对另一底物O2的表观Km和Vmax分别为0.16±0.01mmol/L和0.97±0.03U/mg。本发明所述的D‑乳酸氧化酶可用于制备通过测定过氧化氢浓度来检测D‑乳酸的生物传感器，实现D‑乳酸简便、快速的定量检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 乳酸 氧化酶 及其 检测 中的 应用 | ||
【主权项】：
一种D‑乳酸氧化酶在制备检测D‑乳酸的生物传感器中的应用；其中，所述D‑乳酸氧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；该酶为可溶性蛋白，辅因子为FAD，其最适温度为55℃，最适pH为8.0，在pH 7.0～9.0范围内具有60％以上的酶活；该酶能够以分子氧为直接电子受体催化D‑乳酸氧化生成丙酮酸和过氧化氢，当D‑乳酸浓度在0.1～1.3mmol/L范围内时，该酶催化生成的过氧化氢浓度与初始D‑乳酸浓度呈线性相关；该酶对D‑乳酸的表观Km和Vmax分别为3.62±0.53mmol/L和0.52±0.05U/mg，该酶对另一底物O2的表观Km和Vmax分别为0.16±0.01mmol/L和0.97±0.03U/mg。
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