[发明专利]Runx2重组慢病毒感染骨髓间充质干细胞表达成骨基因的方法在审
| 申请号： | 201510136295.X | 申请日： | 2015-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN104805122A | 公开（公告）日： | 2015-07-29 |
| 发明（设计）人： | 王大平;熊建义;张巨峰;付志杰;李庆庆;廖福朋 | 申请（专利权）人： | 深圳市第二人民医院 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12Q1/70 |
| 代理公司： | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人： | 张全文 |
| 地址： | 518000 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明适用于生物医药技术领域，提供了一种Runx2重组慢病毒感染骨髓间充质干细胞表达成骨基因的方法。该方法包括下述步骤：Runx2基因提取及质粒构建；Runx2重组慢病毒的包装；Runx2重组慢病毒感染骨髓间充质干细胞，获得能够表达成骨基因的感染骨髓间充质干细胞。 | ||
| 搜索关键词： | runx2 重组 病毒感染 骨髓 间充质 干细胞 表达 基因 方法 | ||
【主权项】：
一种Runx2重组慢病毒感染骨髓间充质干细胞表达成骨基因的方法，包括下述步骤：Runx2基因提取及质粒构建：从骨肉瘤细胞系中抽提总RNA，反转录成cDNA，分别设计Runx2基因的上游引物和下游引物，利用上述引物通过反转录PCR扩增Runx2基因；将慢病毒表达载体质粒与所述扩增Runx2基因使用PspXI限制性内切酶进行酶切处理，将酶切处理产物连接后转化处理，将转化产物质粒抽提，得到Runx2重组慢病毒载体质粒；Runx2重组慢病毒的包装：将所述Runx2重组慢病毒载体质粒和包装质粒共转染至293Ta细胞中，进行病毒包装，获得Runx2重组慢病毒，并对病毒滴度进行监控；Runx2重组慢病毒感染骨髓间充质干细胞：获取骨髓间充质干细胞，加入Runx2重组慢病毒进行慢病毒感染，获得能够表达成骨基因的感染骨髓间充质干细胞。
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