[发明专利]一种粗多糖的检测方法

摘要

本发明公开了一种粗多糖的检测方法，包括以下步骤：a、赭曲霉种子的固体斜面培养；b、滤出发酵液；c、以去离子水定容，充分溶解混匀，作为供试品溶液备用；d、配制1mg/ml标准品水溶液备用；e、准备薄层色谱板和展开室；f、量取各单糖标准品水溶液和粗多糖供试液2μl，依次点样于薄层板的点样线上；g、展开剂展开至距离薄层板上端2cm后结束，取出薄层板晾干，喷以苯胺-邻苯二甲酸溶液，立即吹干，在110℃加热至斑点显色清晰，即可观察到粗多糖的检测结果。通过采用薄层色谱法测定发酵液和菌丝体中粗多糖的含量，能够快速准确的得到检测结果，且操作简单方便，尤其适用于样品的定性分析研究。

主权项

一种粗多糖的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：a、赭曲霉种子的固体斜面培养：从斜面挑取金黄色的成熟孢子，接种于液体摇瓶培养7天，整个培养及操作过程均需确保在无菌状态；b、培养结束后，滤出发酵液，通过超声破碎菌丝体细胞1小时，滤过，菌丝体加水100℃浸提2次，每次1小时，合并4次滤液，减压浓缩至100ml，放置4℃冰箱，24小时后，经微孔滤膜滤去蛋白质沉淀，再向滤液中加入乙醇达80％，静置过夜，通过醇沉法使滤液中的粗多糖以固体形态充分被析出；c、将析出的粗多糖滤出后，55℃±5℃烘干，称取25mg至25ml容量瓶，以去离子水定容，充分溶解混匀，作为供试品溶液备用；d、分别准确配制1mg/ml葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖标准品水溶液备用；e、准备薄层色谱板和展开室，近色谱板底部2～3cm处用铅笔画点样直线，展开剂正丁醇：乙酸乙酯：吡啶：水的重量比为6:1:5:4；f、分别精密量取各单糖标准品水溶液和粗多糖供试液2μl，依次点样于薄层板的点样线上，再在展开室加入适量已准备的展开剂，将薄层板放入展开室，薄层板底部浸入展开剂进行展开；g、展开剂展开至距离薄层板上端2cm后结束，取出薄层板晾干，喷以苯胺‑邻苯二甲酸溶液，立即吹干，在110℃加热至斑点显色清晰，即可观察到粗多糖的检测结果。