[发明专利]一种固定游离氮木质素的培育方法

摘要

本发明涉及一种固定游离氮木质素的培育方法，属于生物质能开发的领域。通过选择固定氮源菌落的土壤作为菌源，提出固氮木质素，再通过水浴法合成木质素胺，木质素胺经提纯后放入到土壤中，在常温下培养5天后，经干燥、浸提、过滤、回流、冷却后，获得能固定游离氮的木质素。取某玉米地的土壤，经风干后研磨过筛，取上述的木质素胺放入其中，烘干，将土壤放于烧杯中，密封于放入少量水的氢氧化钠溶液的塑料盒中培养；然后放于干燥器中，干燥后转移到三角瓶中，加入硫酸钾，震荡后过滤，加入硫酸铜溶液，浓硫酸澄清后回流；冷却后，最后用消化-半自动定氮仪测定其土壤中固态游离氮达42.3mg/kg以上。

主权项

一种固定游离氮木质素的培育方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：取生产过大豆的土壤作为第一菌源，在温度为30℃～35℃，pH 7.5～8.5，光照条件下在氨氮培养基上进行培养20～36h，获得的菌落作为固定游离氮木质素的第二菌源；步骤2：将所述第二菌源、水、碱液按照重量比0.5‑1.5∶1‑3∶0.5‑1.5混合，在常温下搅拌10‑15min使所述第二菌源充分溶解，得第二菌源溶解液；步骤3：向所述第二菌源溶解液中依次加入甲醛、四乙烯五胺，于110‑120℃下进行水浴加热，回流搅拌3‑4h，合成木质素胺；所述第二菌源溶解液、甲醛、四乙烯五胺的重量份比例为2‑6∶0.5‑1.5∶0.2‑1；步骤4：将所述木质素胺加入到铁氰化钾中，使其完全沉淀出来，抽滤，用去离子水进行充分洗涤2‑3次，最后抽干后于干燥器中干燥，得干燥后木质素胺；步骤5：取玉米地的土壤，经自然风干后研磨过筛，取所述干燥后木质素胺放入到马弗炉中进行烘干；取烘干后木质素胺，密封于含有氢氧化钠溶液的容器中，21‑25℃下培养3‑7天，得培养后木质素胺；步骤6：取所述培养后木质素胺，放于干燥器中，抽真空后保持三氯化碳沸腾，干燥后转移，加入硫酸钾浸提剂，震荡后过滤，加入硫酸铜溶液，浓硫酸澄清后回流，即得固定游离氮木质素。