[发明专利]猪ApoE基因敲除载体及其构建方法与应用有效
申请号: | 201510138230.9 | 申请日: | 2015-03-26 |
公开(公告)号: | CN106148406B | 公开(公告)日: | 2019-09-20 |
发明(设计)人: | 李向东;刘原伍;李向清 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;A01K67/027;C12N15/11;C12N15/66 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及猪ApoE基因敲除载体及其构建方法与应用,本发明的载体命名为pApoEKO‑DTA‑M,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其构建方法包括如下步骤:(1)扩增猪ApoE基因侧翼序列作为基因打靶的长臂和短臂;(2)短臂与打靶载体ploxp分别酶切、连接后,再与长臂连接;去除tk,与dta基因片段连接;(3)在长短臂之间插入特异性启动子Cre,构建得到ApoE基因敲除载体。本发明的猪ApoE基因敲除载体可用于培育敲除了ApoE基因的猪,用于动脉硬化模型动物的制备。 | ||
搜索关键词: | apoe 基因 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.猪ApoE基因敲除载体pApoEKO‑DTA‑M,其特征在于,包含ApoE基因上下游同源臂的长臂和短臂,所述长臂的核苷酸序列如SEQ ID NO:1的第1~第5387位;所述短臂的核苷酸序列如SEQ ID NO:1的第9604~第11855位;在同源臂之间还具有标记基因,所述猪ApoE基因敲除载体pApoEKO‑DTA‑M的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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