[发明专利]一种抗锈病黑杨组培苗的继代培养方法

摘要

一种抗锈病黑杨组培苗的继代培养方法，涉及一种黑杨组培苗的继代培养方法。本发明是要解决目前组培扩繁过程中及继代培养后抗锈病的抗性易缺失的问题。方法：一、从活化培养的1年生黑杨休眠枝条上分离叶片，接种锈菌，将接种叶片置于生长室，每天光照，培养7天，计算每株黑杨的病情指数，选择病情指数<25的黑杨植株，对黑杨叶片进行清洗与消毒，接种到培养基进行继代培养，筛选出继代培养20天后病情指数<25的黑杨植株为抗锈病黑杨；二、将筛选得到的抗锈病黑杨组培苗在无菌操作条件下通过切分丛生芽的形式进行扩繁增殖，将丛生芽接种到继代培养基上培养。本发明用于组织培养领域。

主权项

一种抗锈病黑杨组培苗的继代培养方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：一、抗锈病黑杨筛选：从活化培养的1年生黑杨休眠枝条上分离出叶间隔期指数为5～9的完全展开的叶片，每株黑杨取叶片8～12片，接种锈菌，然后将接种叶片置于16℃的生长室，每天进行16h光照，持续培养7天，计算每株黑杨的病情指数，选择病情指数<25的黑杨植株，对黑杨叶片进行清洗与消毒，接种到含300mg/LAmp的1/2MS固体培养基上，进行继代培养20天，筛选出继代培养20天后病情指数<25的黑杨植株为抗锈病黑杨；二、抗锈病黑杨组培苗的继代培养：将步骤一筛选得到的抗锈病黑杨组培苗在无菌操作条件下通过切分丛生芽的形式进行扩繁增殖，将高度为1.5～2.5cm的丛生芽接种到继代培养基上，于温度25℃，光照强度为1000～1500Lux，光照时间为24h/d的条件下进行培养。