[发明专利]灵芝三萜酸提取分离工艺方法

摘要

灵芝三萜酸提取分离工艺方法。本发明涉及一种灵芝提取分离工艺方法，包括如下步骤：(1)先将灵芝发酵菌丝体或灵芝子实体粉碎后萃取，将萃取液合并，超声处理；然后过滤分离；(2)过滤分离后得到滤液α和滤渣；将滤渣加入NaHCO₃溶液，超声处理，过滤得到滤液β；接着将滤液α和滤液β合并，分散得上清液；将上清液酸化得到酸化液；(3)将酸化液用等体积的氯仿提取液萃取后，收集并合并萃取液，将萃取液静置，过滤，得到黄色清液；(4)将黄色清液减压蒸干得到黄色粘稠液体，干燥烘干至恒重。本发明所得到的灵芝三萜酸纯度高，且提取分离时间短，有效提取率高，有机溶剂的消耗较少，不造成二次污染，提取分离工艺操作简便、成本经济，能够应用于大规模工业化生产。

主权项

一种灵芝三萜酸提取分离工艺方法，其特征在于：所述灵芝三萜酸提取分离工艺方法包括如下步骤：(1)先将干燥至恒重的灵芝发酵菌丝体或灵芝子实体粉碎后萃取三至四次，所述萃取方法为：先将灵芝发酵菌丝体或灵芝子实体的粉碎物与氯仿提取液按0.8‑1.2:14(W:V)比例混合，接着将该混合液与浓度为4.8‑5.2％(W:V)的NaHCO₃溶液按照2.8‑3.2:1(V:V)比例混合，浸泡22‑26h后，提取萃取液，将剩余物质按照本方法进行下一次萃取；之后将几次萃取获得的萃取液合并，利用超声辅助设备，在380‑420W超声输出功率下，采用50‑60kHz的超声频率，超声处理28‑32min，停滞8‑12min，再次超声处理28‑32min；然后过滤分离；(2)过滤分离后得到滤液α和滤渣；先将滤渣按0.8‑1.2:8(W:V)比例加入浓度为4.8‑5.2％(W:V)的NaHCO₃溶液，利用超声辅助设备，在380‑420W超声输出功率下，采用50‑60kHz的超声频率，超声处理28‑32min，停滞8‑12min，再次超声处理28‑32min，之后利用孔径为0.4‑0.5μm的微孔滤膜过滤得到滤液β；接着将滤液α和滤液β合并，开启分散机，调整转速至4800‑5200r/min，分散18‑22min，得上清液；之后在3.8‑4.2℃冰浴条件下，将上清液用5.8‑6.2mol/L的稀盐酸进行酸化至pH＝2.8‑3.2，得到酸化液；(3)将酸化液用等体积的氯仿提取液萃取3‑5次后，收集并合并萃取液，将萃取液静置35‑45min，用孔径0.4‑0.5μm的微孔滤膜过滤，得到黄色清液；(4)将黄色清液在44‑46℃条件下减压蒸干得到黄色粘稠液体，将黄色粘稠液体在58‑62℃水浴条件下干燥烘干至恒重；步骤(1)和步骤(3)所述的氯仿提取液是由氯仿和无水乙醇按照95:5‑98:2的体积配比配置而成；步骤(3)中所述的萃取液在静置前先加入纤维素复合酶进行酶解，酶解温度45‑55℃，pH＝5.5‑6.5，酶解时间18‑22min，纤维素复合酶的加入量为萃取液的1.5‑2.5％(W:V)；所述纤维素复合酶由纤维素酶、蛋白酶、果胶酶按比活力4.8‑5.2:2.8‑3.2:1.8‑2.2混合而成。