[发明专利]一种具有近红外光远程响应的三层核‑壳结构药物载体的制备方法

摘要

一种具有近红外光远程响应的三层核‑壳结构药物载体的制备方法。本发明属于生物医用材料领域，具体涉及一种具有近红外光远程响应的三层核‑壳结构药物载体的制备方法。本发明是为了解决现有方法无法同时进行细胞成像、光动疗和光控释药的问题。方法以上转换纳米粒子为核，包覆上实心硅壳，用于包埋光敏剂亚甲基蓝，包覆最外层介孔二氧化硅壳，介孔内部孔道用于载入模型药物罗丹明B；对三层核‑壳纳米粒子进行表面修饰在其外表面上修饰单线态氧响应有机链接分子，链接分子通过化学键合链接的客体分子AD，在介孔中载入药物后客体分子AD可与加入的β‑环糊精络合堵住孔道。本发明用于在癌症诊疗中三位一体实现光控释药、光动疗、细胞成像。

主权项

一种具有近红外光远程响应的三层核‑壳结构药物载体的制备方法，其特征在于具有近红外光远程响应的三层核‑壳结构药物载体的制备方法具体是按以下步骤进行的：一、将NaYF4：Yb/Er上转换纳米粒子分散于环己烷中，得到上转换纳米粒子核；二、将表面活性剂CO‑520在室温下溶解在环己烷中磁力搅拌15min～30min，得到混合液，将步骤一得到的上转换纳米粒子核、光敏剂和氨水加入到混合液中在室温下搅拌20min～40min；然后逐滴加入四乙氧基硅烷，在室温下搅拌20h～26h，离心分离得到固体物，固体物用乙醇清洗3～5次，然后分散到去离子水中，得到包覆有光敏剂的上转换纳米粒子；三、将步骤二得到的包覆有光敏剂的上转换纳米粒子加入到阳离子表面活性剂中，在室温下搅拌25min～40min之后超声25min～40min，然后加入氢氧化钠溶液继续超声25min～40min，然后通过蠕动泵将四乙氧基硅烷与乙醇的混合溶液以0.5mL/h的速度加入到反应体系中，反应液在温度为30～40℃的条件下反应20h～26h，反应结束后通过离心分离，得到固体物，用乙醇清洗固体物3～5次，然后在真空干燥箱中室温干燥12h，得到未除去表面活性剂的固体产物；四、将步骤三得到的未除去表面活性剂的固体产物分散到干燥的甲苯中，然后加入硅烷偶联剂，在氮气保护的情况下加热回流24h后，离心分离，得到固体，采用甲醇清洗固体3～5次后，放入真空干燥箱在室温下干燥12h，得到表面胺基修饰的三层硅球；五、将步骤四得到的表面胺基修饰的三层硅球分散在甲醇溶液中，然后向其中加入浓盐酸，在温度为70℃、搅拌的条件下加热回流24h，反应结束后离心分离，得到固体，采用甲醇清洗固体3～5次后，放入真空干燥箱在室温下干燥24h，得到胺基修饰的介孔硅球；六、将步骤五得到的胺基修饰的介孔硅球分散到二甲亚砜中，超声25min～40min，得到分散好的纳米粒子溶液，然后将单线态氧加入到分散好的纳米粒子溶液中，再将1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐加入到分散好的纳米粒子溶液中，最后将N‑羟基丁二酰亚胺加入到分散好的纳米粒子溶液中，反应体系在室温下反应24h，通过离心的方式分离，然后用水洗涤3～5次再用甲醇清洗3～5次，在真空干燥箱中室温干燥12h，得到修饰了单线态氧敏感分子的纳米粒子；七、将步骤六得到的修饰了单线态氧敏感分子的纳米粒子分散到N,N‑二甲基甲酰胺中超声25min～40min，得到分散液，然后将1‑胺基金刚烷加入到分散液中，再将1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐加入到分散液中，最后将N‑羟基丁二酰亚胺加入到分散液中，反应体系在室温下搅拌反应24h，通过离心的方式分离，然后用水洗涤3～5次再用甲醇清洗3～5次，在真空干燥箱中室温干燥12h，得到客体分子金刚烷修饰的纳米粒子；八、将步骤七得到的客体分子金刚烷修饰的纳米粒子加入到罗丹明B溶液中，超声25min～40min，反应体系在室温下搅拌反应24h，然后向反应体系中加入β‑环糊精，反应体系在室温下搅拌反应48h，反应结束后将载药后的纳米粒子离心分离，固体用pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液清洗3～5次，在真空干燥箱中室温干燥12h，得到具有近红外光远程响应的三层核‑壳结构药物载体；步骤二中所述步骤一得到的上转换纳米粒子核与光敏剂的体积比为1:1；步骤六中所述步骤五得到的胺基修饰的介孔硅球与单线态氧的质量比为1:(4.5～5.5)；步骤八中所述步骤七得到的客体分子金刚烷修饰的纳米粒子的质量与罗丹明B溶液的体积比为1mg:1mL；步骤八中所述步骤七得到的客体分子金刚烷修饰的纳米粒子与β‑环糊精的质量比为1:10。