[发明专利]青霉和酵母菌混菌发酵所产果胶酶及其应用

摘要

本发明属于烟草制备技术领域，具体涉及一种青霉和酵母菌混菌发酵所产果胶酶及其在烟草薄片加工过程中的应用。该果胶酶经过菌种活化、制备种子液、发酵培养、粗提酶液等步骤获得。将该粗酶液按烟草薄片果胶酶=11~10的比例，40~50℃，酶解2~6h用于处理烟草薄片。本发明的总体技术路线是将特定菌种首先混合发酵，筛选优化最佳发酵条件，获得最高果胶酶酶活的粗酶液，将粗酶液用于处理烟草薄片降低其果胶酶含量，获得最佳降解效果。本发明所得粗酶液的酶活最高可达3880U/mL，用于烟草薄片处理后，可将烟草薄片中果胶酶含量由2.07%降低到1.48%，能较好的改善烟草的吸食品质。

主权项

青霉和酵母菌混菌发酵所产果胶酶，其特征在于，该果胶酶采用如下步骤获得：（1）菌种活化，将微生物菌种分别从保藏培养基上挑取，接种到活化培养基中，培养；所述微生物菌种包括：中国工业微生物菌种保藏中心保藏的保藏号为CICC 40923的微紫青霉(Penicillium janthinellum)，和中国工业微生物菌种保藏中心保藏的保藏号为CICC 32295的异常毕赤酵母(Pichia anomala)；（2）制备种子液，将步骤（1）中活化后的菌种分别接种到种子培养基中，制备种子液；（3）发酵培养，将步骤（2）中所制备的种子液混合发酵培养，具体步骤为：首先将微紫青霉种子液接种到发酵培养基中，30℃、160r/min摇床培养24~72h；然后接种进入异常毕赤酵母种子液，30℃、160r/min摇床培养48h；（4）粗提酶液，液体发酵液经离心滤去菌体，再经超滤浓缩得粗酶液，测定酶活后即获得果胶酶成品。