[发明专利]兔鸡鸭鹅牛羊驴马猪鹿的PCR鉴定用引物体系

摘要

本发明公开了一种兔鸡鸭鹅牛羊驴马猪鹿的PCR鉴定用引物体系及PCR鉴定方法，该引物体系可一次性检测多达十个动物物种，达到对常见动物物种基本覆盖的目的；且本发明引物均仅对各自物种目标片段进行特异性扩增，不会与其他物种起反应，因此也能适用于一次PCR反应中导入两种及以上引物对的多重PCR反应，从能有效缩短实验时间；此外在进行PCR时，使用优化的特定PCR反应体系及反应程序，采用统一PCR检测方法，简化了检测流程，建立了快速高效且特异性高的鉴定方式，从而有效的鉴定鹿血制品的真伪及掺假情况，为鹿血的质量控制提供了现代分子生物学的检测手段；此外该引物体系还能配合相关试剂制成试剂盒，方便使用，同时为工业化生产及应用提供了可能，其应用前景极好。

主权项

一种兔鸡鸭鹅牛羊驴马猪鹿的PCR鉴定用引物，其特征在于：由下列引物对组成：(1)对兔12S?rRNA基因进行扩增生成兔特异性扩增片段的引物对Ⅰ：正向引物：5’?CGGCGTAAAGCGTGATTAGAATAA?3’反向引物：5’?GCTATCGTGAGTTCGAAGAGTAT?3’；(2)对鸡12S?rRNA基因进行扩增生成鸡特异性扩增片段的引物对Ⅱ：正向引物：5’?CCATCTTAGCCTCAACGATTAA?3’反向引物：5’?GGCTATTGAGCTCACTGTTGTT?3’；(3)对鸭D?Loop基因进行扩增生成鸭特异性扩增片段的引物对Ⅲ：正向引物：5’?GCGCTATCCTATATCTCAGGGATTA?3’反向引物：5’?TGATTGTCATCGGGTTTGGATCGT?3’；(4)对鹅Cytb基因进行扩增生成鹅特异性扩增片段的引物对Ⅳ：正向引物：5’?ATCCCGTACATTGGGCAAACTCTA?3’反向引物：5’?TAGAGGGGTGATTATTAAGGTAAG?3’；(5)对牛Cytb基因进行扩增生成牛特异性扩增片段的引物对Ⅴ：正向引物：5’?GGCCCTCTTACTAATTCTAGCT?3’反向引物：5’?CCGATGGTGATATATGGGTGTT?3’；(6)对山羊Cytb基因进行扩增生成山羊特异性扩增片段的引物对Ⅵ：正向引物：5’?GGCGCCATGCTACTAATTCTTGTT?3’反向引物：5’?GAGGAAGGGTACAAGTACTAAGAT?3’；(7)对驴16S?rRNA基因进行扩增生成驴特异性扩增片段的引物对Ⅶ：正向引物：5’?CAAGCTCAACGTCACACATATC?3’反向引物：5’?CCTGTGTTGGGTTAACAATAGTC?3’；(8)对马16S?rRNA基因进行扩增生成马特异性扩增片段的引物Ⅷ：正向引物：5’?CAAGCTCAACGACACATCTATC?3’反向引物：5’?CCCTGAAGGTTAAGGTTTGTG?3’；(9)对猪12S?rRNA基因进行扩增生成猪特异性扩增片段的引物Ⅸ：正向引物：5’?GCACACCTATAACGGTAGCTCAT?3’反向引物：5’?TCCTAGCTATCGTGTGTCAGGAT?3’；(10)对鹿12S?rRNA基因进行扩增生成鹿特异性扩增片段的引物对Ⅹ：正向引物：5’?CAGCCTTCCTATTGACCCTTAAT?3’反向引物：5’?CGGCTGTAAAGTTACTTTCGTTG?3’。