[发明专利]一种体外评价卷烟及烟草安全性的方法

摘要

本发明公开了一种体外评价卷烟及烟草安全性的方法，其特征在于运用含硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活力的生物试剂，通过检测卷烟或烟草燃烧后的烟气水提取液(CSE)对TrxR活力抑制能力，以CSE在340nm处的吸光度值作为定量基础，评价卷烟及烟草安全性的方法。本发明成功解决了当前卷烟危害评价周期长、评价机制复杂等问题，为企业改良烟草品质、发展低危害卷烟提供一种可靠的评价手段。

主权项

一种体外评价卷烟及烟草安全性的方法，其特征在于：步骤1：将待评价的各个卷烟或烟草分别进行抽吸，并分别配制成烟气水提取液，检测烟气水提取液在340nm处的吸光度值OD340nm，以OD340nm作为评价卷烟或烟草安全性的定量基础；步骤2：配制含硫氧还蛋白还原酶活力的生物试剂，运用5,5′‑二硫双(2‑对硝基苯甲酸)还原法测定所述生物试剂中硫氧还蛋白还原酶的活力值，记为H0；所述生物试剂为鼠肝匀浆液、鼠肺匀浆液或TrxR纯酶制品；步骤3：通过向相同体积的所述生物试剂中加入不同量的烟气水提取液进行20min的孵育，使烟气水提取液对所述生物试剂中的硫氧还蛋白还原酶活力产生抑制，测定抑制后生物试剂中硫氧还蛋白还原酶的活力值H1，并计算获得烟气水提取液对生物试剂中的硫氧还蛋白还原酶活力的抑制率T＝(H0‑H1)/H0×100％，做出抑制率的剂量效应曲线，从所述抑制率的剂量效应曲线中烟气水提取液的加入量与抑制率呈线性关系的范围内选择除零点外的任意烟气水提取液的加入量作为烟气水提取液的合适加入量，记为m，单位为微升；确定在所述合适加入量下烟气水提取液对生物试剂中的硫氧还蛋白还原酶活力的抑制率，记为T0；将所述合适加入量m校正至10微升，获得合适加入量的校正值M＝m/10；步骤4：按步骤3的方法确定各个卷烟或烟草的烟气水提取液对生物试剂中的硫氧还蛋白还原酶活力的抑制率T0和合适加入量的校正值M；步骤5：计算获得各个卷烟或烟草的安全性评价值S＝T0/(M×OD340nm)，以所述安全性评价值S比较各个卷烟或烟草的安全性。