[发明专利]一种富含γ-氨基丁酸的红曲醋制备方法

摘要

本发明涉及一种富含γ-氨基丁酸的红曲醋制备方法。本发明首先将经MRS固体斜面培养基上培养的植物乳杆菌菌体细胞配制成植物乳杆菌悬浮液，再接种于液体培养基中摇床培养植物乳杆菌种子液，注入平板式膜生物反应器1中进行增殖培养。同时将巴氏醋杆菌种子液、红曲黄酒注入平板式膜生物反应器2进行增殖培养。最后将植物乳杆菌发酵醪液、米烧酒混合，泵入平板式膜生物反应器2，通过发酵得到富含γ-氨基丁酸的红曲醋。本发明采用聚丙烯中空纤维膜反应器，增殖与发酵过程在两个膜生物反应器中进行，方法简单，工艺可控，节约能源；制备得到的红曲醋中γ-氨基丁酸含量与传统方法相比提高了120～230%。

主权项

一种富含γ‑氨基丁酸的红曲醋制备方法，其特征是：（1）植物乳杆菌的载体吸附与增殖刮下经MRS固体斜面培养基上培养的植物乳杆菌菌体细胞，用无菌水配成菌体细胞数为1～5×10⁶mL^‑1的植物乳杆菌悬浮液；取植物乳杆菌悬浮液接种于装有MRS液体培养基三角瓶，接种量为10% MRS液体培养基体积量，培养温度28℃，在摇床上转速为200r／min振荡培养2天，培养成植物乳杆菌种子液；把制备好的植物乳杆菌种子液注入平板式膜生物反应器1，注入量以液面超过载体高度4cm标识处为止，打开1/4进气阀门，通入无菌空气，气泡驱动植物乳杆菌种子液回流循环，植物乳杆菌的菌体细胞被聚丙烯中空纤维载体所吸附，而余下液体进入膜元件内部经过排液口抽出；用不锈钢泵以2L／min的流量将增殖培养基液注入膜生物反应器1内，注入量以液面超过载体高度4cm标识处为止，控制品温在28℃～30℃之间，聚丙烯中空纤维载体所吸附的植物乳杆菌的菌体细胞进行24小时增殖培养，期间每隔5 h通入无菌空气曝气5 min，通气量为0.01～0.03m³/（m³·min）；（2）植物乳杆菌发酵醪液的制备将红曲醋液与红曲黄酒混合组成醋酒混合液，调整醋酒混合液pH值为5.0～5.4之间，用不锈钢泵以2L／min的流量，将醋酒混合液注入平板式膜生物反应器1，注入量以液面超过载体高度4cm标识处为止，平板式膜生物反应器1内醋酒混合液控制品温28～30℃，进行48 h发酵，发酵结束得到植物乳杆菌发酵醪液；（3）巴氏醋杆菌的载体吸附与增殖刮下经MRS固体斜面培养基上培养的取巴氏醋杆菌的菌体细胞，用无菌水配成菌体细胞数为1～5×10⁶mL^‑1悬浮液；取巴氏醋杆菌悬浮液接种于装有MRS液体培养基三角瓶，接种量为10% MRS液体培养基体积量，培养温度28℃，在摇床上转速为200r／min，振荡培养2天，培养成巴氏醋杆菌种子液备用；将制备好的巴氏醋杆菌种子液注入平板式膜生物反应器2，注入量以液面超过载体高度4cm标识处为止；打开1/4进气阀门，通入无菌空气，气泡驱动巴氏醋杆菌种子液回流循环，巴氏醋杆菌细胞被聚丙烯中空纤维载体所吸附，而余下液体进入膜元件内部经过排液口抽出；用不锈钢泵以2L／min的流量，将红曲黄酒输入平板式膜生物反应器2进行增殖培养，注入量以液面超过载体高度4cm标识处为止，控制品温在32～34℃之间，进行24小时增殖培养，期间每隔3 h通入无菌空气曝气10 min，通气量为0.01～0.03m³/（m³·min）；（4）富含γ‑氨基丁酸的红曲醋制备将植物乳杆菌发酵醪液注入贮液罐内，并加入25%voL酒精度的米烧酒混合成红曲醋发酵混合液，其比例是植物乳杆菌发酵醪液：米烧酒=3 L：2 L；用不锈钢泵以2L／min的流量，将贮液罐中红曲醋发酵混合液泵入平板式膜生物反应器2，注入量以液面超过载体高度4cm标识处为止，打开1/4进气阀门，通入无菌空气，气泡驱动膜生物反应器2红曲醋发酵混合液回流循环，控制品温32℃～34℃之间，进行76～80h发酵，得到富含γ‑氨基丁酸的红曲醋。