[发明专利]一种多肽提取纯化方法和试剂盒

摘要

本发明公开了一种多肽提取纯化方法和试剂盒，该方法包括，多肽提取：将待提取样本与含有蛋白质多肽变性剂和蛋白酶抑制剂的缓冲液混合，反应后分离上清液；还原烷基化处理：取上清液与还原剂混合进行还原反应，然后加入烷基化试剂进行烷基化反应；多肽富集纯化：a）使还原烷基化处理后的样品通过能够结合多肽的萃取器，萃取器预先用洗脱缓冲液清洗并活化然后用清洗液清洗并平衡；b）使清洗液通过萃取器以去除不结合的非多肽物质；c）依次使洗脱缓冲液和清洗液通过萃取器并收集穿透液。本发明的方法和试剂盒适用于所有类型样本的多肽提取和纯化，操作简便快速，多肽提取效率、富集纯化效率以及回收率高，重复性好，具有很好的应用前景。

主权项

 一种多肽提取纯化方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：多肽提取：将待提取样本与含有蛋白质多肽变性剂和蛋白酶抑制剂的缓冲液混合，反应后分离上清液；还原烷基化处理：取所述上清液与还原剂混合进行还原反应，然后加入烷基化试剂进行烷基化反应；多肽富集纯化：a）使所述还原烷基化处理后的样品通过能够结合多肽的萃取器，所述萃取器预先用洗脱缓冲液清洗并活化然后用清洗液清洗并平衡；任选地，重复该步骤至少一次；b）使清洗液通过所述萃取器以去除不结合的非多肽物质；任选地，重复该步骤至少一次；c）依次使洗脱缓冲液和清洗液通过所述萃取器并收集穿透液；任选地，重复该步骤至少一次，并混合所述穿透液；任选地，将所述穿透液离心抽干得到纯化后的多肽。