[发明专利]一种固定化芽孢漆酶及其制备与应用

摘要

本发明公开了一种固定化芽孢漆酶及其制备与应用，属于固定化技术领域和废水处理领域。本发明固定化芽孢漆酶是由芽孢杆菌属菌株所产的芽孢漆酶通过离子键和氢键固定在DEAE‑纤维素上形成的，它保留了芽孢漆酶广泛的pH适应能力和耐热性；在含有机溶剂、金属离子或抑制剂的溶液中，固定化芽孢漆酶具有比游离芽孢漆酶更强的稳定性。其制备过程主要包含芽孢的制备、载体预处理、吸附和收集四个步骤，操作简便，固定化率高。本发明提供的固定化芽孢漆酶具有很强的染料脱色能力，将其应用于纺织染料如甲基绿、甲基红、酸性红1和结晶紫的脱色处理，最高脱色率可达到95％左右。载体也可以选择性地吸附染料，与漆酶形成互补作用。

主权项

1.一种制备固定化芽孢漆酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备芽孢杆菌属菌株的芽孢；(2)载体预处理：添加5倍柱体积的去离子水对DEAE‑纤维素进行溶涨、搅拌，并静置过夜；DEAE‑纤维素溶涨过夜后沉降下来，倾去含悬浮微粒的上清液，过滤；过滤所得的DEAE‑纤维素，用酸处理1h，所述酸为0.5M HCl，水洗到中性，过滤，再用碱处理 1h，所述碱为0.5M NaOH，水洗到中性，过滤并收集；(3)将制备好的芽孢按0.01－0.5g湿重芽孢：1gDEAE‑纤维素的比例混合在缓冲液中，在4－40℃， 50－250r/min 条件下吸附 1－48h；(4)芽孢与DEAE‑纤维素的混合物经混合吸附后，过滤，用缓冲液冲洗1－5次，过滤，收集固定化芽孢，保藏于 0－40℃。