[发明专利]一种荷叶总生物碱提取工艺

摘要

本发明公开一种荷叶总生物碱提取工艺，该提取工艺包括荷叶预处理-荷叶总生物碱的提取-树脂纯化荷叶总生物碱-石油醚萃取与结晶纯化，本发明提取工艺简单、缩短实验时间、降低能耗、减少实验操作费用和生产成本，提取出来的荷叶总生物碱纯度高。

主权项

一种荷叶总生物碱提取工艺，其特征在于，所述的提取工艺具体操作步骤如下：（一）荷叶预处理将新鲜荷叶用磷酸水溶液淋洗一次，蒸馏水浸泡5‑10min，淋洗至水溶液至中性，用鼓风干燥箱子干燥含水量8‑10%以下，粉碎过40目筛，装入密封料袋中，放入冰箱中冷藏，备用；其中，所述的磷酸水溶液的pH为3.5‑4.5；（二）荷叶总生物碱的提取取预处理好的荷叶粉，溶解于pH=2.5的盐酸的水溶液中，微波照射处理后，置于恒温水浴锅中提取2.5h，过滤，滤渣再用盐酸溶液提取1.5h，合并两次滤液，用旋转蒸发仪真空浓缩，过滤，滤液调节pH值至2‑3，用氯仿萃取，弃去氯仿层，以除去脂类和树脂；取上层液，加入3%的氢氧化钠调节pH至7左右，静置片刻，待肉眼可见沉淀，过滤，除去鞣质；滤液再加入3%的氢氧化钠调节pH至10.5左右，再用氯仿萃取，在旋转蒸发仪中蒸发干燥后，用pH=2.5的盐酸溶液在超声波清洗机上洗脱生物碱，转移至容量瓶，定容，摇匀得到荷叶总生物碱提取液，备用；其中，所述的固液比为1:40‑1:30；（三）树脂纯化荷叶总生物碱（1）树脂的预处理a.乙醇浸泡：将树脂浸泡在95%或无水乙醇中，并不时用玻璃棒搅拌，使树脂和乙醇充分接触，树脂浸泡时间为18‑24h；b.乙醇冲洗：将浸泡好的树脂装柱，再用无水乙醇冲洗，直至流出液加等量蒸馏水无白色浑浊；c.蒸馏水冲洗：用大量的蒸馏水冲洗树脂直至流出液无醇味；（2）装柱将玻璃层析柱垂直固定在实验架上，关闭底柱活塞，在柱中加入一定量的蒸馏水，然后将树脂带水边搅拌边缓慢加入层析柱中，保持层析柱中水面高于树脂层面3‑5cm，过多的水由柱底活塞放出；（3）上样液的制备将上述步骤（二）中提取得到的荷叶总生物碱提取液用氢氧化纳调成碱性pH为10‑11，再加入无机盐，即得到上样液；其中所述的无机盐为氯化钠、硫酸钠、硫酸铵中的一种；(4)吸附和洗脱将上样液经过装有大孔树脂的玻璃层析柱进行吸附处理，然后再用洗脱剂对玻璃层析柱子进行洗脱处理；其中，所述的洗脱剂为甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种混合物；(四) 石油醚萃取与结晶纯化将步骤（三）中经树脂纯化后的荷叶总生物碱，在60℃条件下，用石油醚萃取，趁热过滤，滤液冷却至室温后，即有少量针状晶体析出后，移至‑20℃冰箱中结晶24h，将结晶的晶体抽虑出来，真空干燥5‑7h得到高纯度荷叶总生物碱。