[发明专利]一种富硒羊肚菌深层发酵工艺

摘要

本发明公开了一种富硒羊肚菌深层发酵工艺，该富硒羊肚菌深层发酵工艺包括羊肚菌母种的转接及活化-接种到摇瓶深层发酵培养基中-加入亚硒酸钠-深层发酵培养-富硒羊肚菌菌丝体，本发明该发酵工艺简单易行，发酵效率高，成本低廉，制备出的富硒羊肚菌含硒高，产量高，安全系数好。

主权项

一种富硒羊肚菌深层发酵工艺，其特征在于，该深层发酵工艺的流程为：羊肚菌母种的转接及活化‑接种到摇瓶深层发酵培养基中‑加入亚硒酸钠‑深层发酵培养‑富硒羊肚菌菌丝体，其中：（1）羊肚菌母种的转接，将母种转接在配制好的斜面培养基上具体为：首先将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对它们进行紫外照射杀菌20‑28min，关闭紫外灯，然后从冰箱中取出保藏的母种，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取母种，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完成后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后塞入棉塞或胶塞，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，控制温度为24℃，静置培养1‑3天，然后将其放入0‑3℃的冰箱中保藏；羊肚菌母种的活化，活化前要将接种环、酒精灯、酒精棉球、打火机以及配制好的斜面培养基放在净化工作台里，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌28‑35min，然后从冰箱中取出保藏的要活化的菌种，开始接种前先将净化工作台的紫外灯关闭，双手用酒精棉球进行消毒，接种时先将接种环用酒精灯的火焰反复灼烧，待冷却后用接种环挑取菌种的菌丝块，并快速接种至预先配制好的斜面培养基上，接种完毕后，将斜面培养基的试管口用火焰进行杀菌，然后方可塞入棉塞或胶塞；接种结束后，将接种后的菌种放入恒温恒湿箱中，设定温度为 25℃，静置培养24‑48h即可完成菌种的活化；其中，所述的羊肚菌母种转接和活化时的斜面培养基按质量份数计包括以下组分：马铃薯：20‑25份，葡萄糖：1‑2份，琼脂：1‑2份，磷酸二氢钾：0.2‑0.5份，硫酸镁0.1‑0.3份，蒸馏水10‑20份；（2）接种到摇瓶深层发酵培养基中，先配制深层发酵培养基，所述的深层发酵培养基按质量份数计包括以下成份：亚硒酸钠5‑10份，磷酸二氢钾：0.1‑0.3份，蒸馏水：5‑8份，硫酸镁：1‑2份，黄豆粉：2‑3份，麦麸：3‑5份，玉米粉：1‑3份；所述深层发酵培养基的制备具体为：首先把麦麸、玉米粉、黄豆粉放入烧杯中，加水煮沸 25‑29min，然后用纱布滤去杂质，加入磷酸二氢钾和硫酸镁，加水定容至100mL，再加热 7‑10min，待所有药品充分溶解后，装入500ml的摇瓶中，放到灭菌锅里，在 121℃的条件下对其进行灭菌，20‑26min 后取出，放入净化工作台中打开紫外杀菌灯，杀菌28‑35min，等待其自然冷却，冷却后向摇瓶中中加入亚硒酸钠制得深层发酵培养基；在净化工作台上，打开紫外灯，对相关的接种器具进行紫外照射杀菌30‑35min，对接种环反复灼烧，然后从活化的斜面菌种中取一块接入液态深层发酵培养基中，然后用注射器向深层发酵培养基加入亚硒酸钠，最后将摇瓶的瓶口放在酒精灯的火焰上方消毒，然后塞上棉塞，并用消毒后的报纸将瓶口封严，把接入羊肚菌菌种后的摇瓶放入振荡培养箱中，控制培养温度为25‑27℃，振荡培养箱转速为90‑100r/min，振荡2‑4天后取出，得到富硒羊肚菌菌丝体。