[发明专利]与雌马酚合成有关的酶

摘要

本发明的目的在于提供一种与雌马酚合成相关的酶、编码上述酶的基因、及使用上述酶和基因制备雌马酚及其中间体的方法。本发明提供二氢黄豆苷元合成酶、四氢黄豆苷元合成酶及雌马酚合成酶和编码上述酶的基因。并且，本发明提供一种使用上述酶合成二氢黄豆苷元、四氢黄豆苷元及/或雌马酚的方法。

主权项

一种多肽，其具有以四氢黄豆苷元为底物合成雌马酚的活性，并且包含在序列号13所示的氨基酸序列中进行了下述(1)～(41)中至少一个氨基酸取代而得的氨基酸序列，(1)对第3位的谷氨酸，用天冬氨酸进行的取代；(2)对第61位的天冬酰胺，用谷氨酰胺进行的取代；(3)对第80位的异亮氨酸，用丙氨酸、亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(4)对第92位的天冬酰胺，用谷氨酰胺进行的取代；(5)对第112位的天冬氨酸，用天冬氨酸进行的取代；(6)对第119位的丙氨酸，用亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(7)对第129位的天冬酰胺，用谷氨酰胺进行的取代；(8)对第172位的天冬氨酸，用谷氨酸进行的取代；(9)对第174位的丙氨酸，用亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(10)对第204位的丝氨酸，用甘氨酸、丙氨酸、苏氨酸或甲硫氨酸进行的取代；(11)对第206位的谷氨酸，用天冬氨酸进行的取代；(12)对第223位的苏氨酸，用丝氨酸进行的取代；(13)对第230位的缬氨酸，用丙氨酸、亮氨酸或异亮氨酸进行的取代；(14)对第246位的酪氨酸，用苯丙氨酸或色氨酸进行的取代；(15)对第280位的苏氨酸，用丝氨酸进行的取代；(16)对第282位的精氨酸，用赖氨酸或组氨酸进行的取代；(17)对第285位的丙氨酸，用亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(18)对第307位的缬氨酸，用丙氨酸、亮氨酸或异亮氨酸进行的取代；(19)对第322位的丙氨酸，用亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(20)对第347位的谷氨酸，用天冬氨酸进行的取代；(21)对第359位的甘氨酸，用丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸或甲硫氨酸进行的取代；(22)对第360位的丝氨酸，用苏氨酸进行的取代；(23)对第366位的丙氨酸，用亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(24)对第367位的亮氨酸，用丙氨酸、异亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(25)对第368位的异亮氨酸，用丙氨酸、亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(26)对第372位的缬氨酸，用丙氨酸、亮氨酸或异亮氨酸进行的取代；(27)对第373位的天冬氨酸，用谷氨酸进行的取代；(28)对第374位的苏氨酸，用丝氨酸进行的取代；(29)对第377位的丙氨酸，用亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(30)对第380位的丙氨酸，用亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(31)对第381位的天冬氨酸，用谷氨酸进行的取代；(32)对第399位的谷氨酰胺，用天冬酰胺进行的取代；(33)对第404位的甲硫氨酸，用甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸或苏氨酸进行的取代；(34)对第405位的缬氨酸，用丙氨酸、亮氨酸或异亮氨酸进行的取代；(35)对第406位的谷氨酸，用天冬氨酸进行的取代；(36)对第407位的甘氨酸，用丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸或甲硫氨酸进行的取代；(37)对第426位的精氨酸，用赖氨酸或组氨酸进行的取代；(38)对第434位的缬氨酸，用丙氨酸、亮氨酸或异亮氨酸进行的取代；(39)对第436位的丙氨酸，用亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸进行的取代；(40)对第438位的酪氨酸，用苯丙氨酸或色氨酸进行的取代；(41)对第440位的丙氨酸，用亮氨酸、异亮氨酸或缬氨酸进行的取代。