[发明专利]一种核壳结构的温敏性磁性蛋白质印迹微球的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种核壳结构的温敏性磁性蛋白质印迹微球的制备方法及其应用，制备方法是采用改进的水热法制备Fe3O4纳米颗粒，利用沉淀聚合法合成带有识别位点及辅助识别聚合物链的复合微球载体，将上述载体与模板分子蛋白，功能单体，辅助单体及交联剂进行预组装、聚合和交联，再进一步洗脱模板分子蛋白得到具有核壳结构的温敏性磁性蛋白质印迹微球；制备的印迹微球表面有对目标蛋白分子识别位点和辅助识别聚合物链存在，增加了识别的比表面积，提高了印迹特异性和高效性，且具有可通过外界磁场分离的特性及通过温度控制对目标蛋白的结合与脱附，将其应用于分离复杂生物体系中的目标蛋白，选择专一性好，分离速度快，操作简单，为复杂生物体系中蛋白质的分离富集提供了一种新的可行性方法。

主权项

一种核壳结构的温敏性磁性蛋白质印迹微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：通过有机溶剂‑水热法制备Fe3O4纳米颗粒；步骤二：以4‑乙烯基吡啶为聚合单体，二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂，通过沉淀聚合法，在Fe3O4纳米颗粒表面修饰一层4‑乙烯基吡啶聚合物膜，得到含有识别位点和辅助识别聚合物链的磁性微球载体；步骤三：将含有识别位点和辅助识别聚合物链的磁性微球载体、N‑异丙基丙烯酰胺，甲基丙烯酸，模板分子蛋白，交联剂加入到中性PBS缓冲液中在35℃～39℃的条件下进行预组装5～8h后，通过引发剂引发聚合，在35℃～39℃温度下进行聚合反应；步骤四：将步骤三的聚合产物，在20℃～30℃温度下，通过振荡洗脱模板分子蛋白，即得具有核壳结构的温敏性磁性蛋白质印迹微球。