[发明专利]一种人源溶菌酶蛋白发酵方法

摘要

本发明属于基因工程和发酵工程领域，提供了一种人源溶菌酶蛋白发酵方法，将表达人源溶菌酶的种子发酵液加入发酵罐进行高密度发酵；所述的高细胞密度发酵包括甲醇诱导、添加胰蛋白胨和甘油补料；发酵罐高密度发酵采用BSM发酵培养基，接种5％的种子培养液。利用本发明的方法获得的人源溶菌酶，活性最高分别为151600U/mL和127300U/mL，蛋白表达量最高达1.65g/L，且批次具有较好的稳定性。放大结果理想，为工业化生产提供了实际参考依据。

主权项

一种人源溶菌酶蛋白发酵方法，其特征在于，该人源溶菌酶蛋白发酵方法为将表达人源溶菌酶的种子发酵液加入发酵罐进行高密度发酵；所述的高密度发酵包括甲醇诱导、添加胰蛋白胨和甘油补料；发酵罐高密度发酵采用BSM发酵培养基，接种5％的种子培养液；所述的BSM发酵培养基的配方为：磷酸26.7mL，CaSO₄0.93g，K₂SO₄18.2g，MgSO4.7H₂O 14.9g，KOH 4.13g，甘油40g，PTM14mL，泡敌1mL；加水至1L定容；其中，PTM1溶液的配方为：CuSO₄.5H₂O 6g，KI 0.08g，MnSO₄.H₂O 3g，Na₂MoO₄.2H₂O0.2g，H₃BO₃0.02g，ZnSO₄.7H₂O 20g，FeSO₄.7H₂O 65g，CoCl₂.6H₂O 0.916g，H₂SO₄5mL，Biotin 0.2g，加水至1L定容。