[发明专利]一种碱性脂肪固定化碱性脂肪酶

摘要

本发明公开了一种固定化碱性脂肪酶的制作方法，1）提取液酶；2）固化；3）甘氨酸处理；4）将步骤3）得到的固化酶用2倍体积的1mol/L磷酸盐溶液搅拌洗涤并压干，重复5次，再用2倍体积的1mol/L磷酸盐溶液浸泡固化酶，搅拌30min，离心分离得到固化酶；5）将步骤4）得到的固化酶投入到1倍体积的95%的乙醇中，搅拌处理10min，然后离心分离得到碱性脂肪酶；6）将步骤5）得到的碱性脂肪酶固化酶在40℃、真空度-0.09MPa的环境下烘干10h得到固定化碱性脂肪酶成品。本发明在脂肪酶提取过程中不使用大量有机溶剂和其他有害原料，提高了固化酶活，提高产品的使用批次达200或以上。

主权项

一种固定化碱性脂肪酶的制作方法，其特征在于：依次包括以下步骤：1）将固含量为420g/L的碱性脂肪酶发酵液3.8t冷却至10℃，离心分离2h得到菌渣和液酶；2）将液酶升温至30℃，加入磷酸盐至磷酸盐浓度为1mol/L，然后投入200kg载体，用氢氧化钾调节pH至6.0，搅拌24h，静置20h，离心分离得到固化酶和上清液；3）向载体4倍体积的上清液中加入15.17kg甘氨酸，待甘氨酸全部溶解后，投入固化酶，用氢氧化钾调节pH至7~8，搅拌1.5h，用空压在罐内压干甘氨酸，收集在罐内的固化酶；4）将步骤3）得到的固化酶用2倍体积的1mol/L磷酸盐溶液搅拌洗涤并压干，重复5次，再用2倍体积的1mol/L磷酸盐溶液浸泡固化酶，搅拌30min，离心分离得到固化酶；5）将步骤4）得到的固化酶投入到1倍体积的95%的乙醇中，搅拌处理10min，然后离心分离得到碱性脂肪酶；6）将步骤5）得到的碱性脂肪酶固化酶在40℃、真空度‑0.09MPa的环境下烘干10h得到固定化碱性脂肪酶成品。