[发明专利]基于电化学检测精子顶体酶活性的方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种基于电化学检测精子顶体酶活性的方法，其包含：将精子顶体酶底物修饰的电极分别于含有不同浓度精子顶体酶标准样品中充分浸渍，并分别测试所述电极的阻抗，由此建立活性精子顶体酶浓度与电极阻抗的标准曲线；以及，将所述电极分别于含有未知浓度精子顶体酶的待测样品中充分浸渍，并测试所述电极的阻抗，再依据所述标准曲线而获知所述待测试样中精子顶体酶的浓度；其中所述标准样品和待测样品均以适于使精子顶体酶专一结合并水解所述精子顶体酶底物的缓冲液作为溶剂。本发明还公开了一种试剂盒。藉由本发明的试剂盒及检测方法，能快速(3min左右)、可靠、灵敏(检测限可达0.001μM)且低成本的检测精子顶体酶的活性。

主权项

1.一种精子顶体酶活性检测试剂盒，其特征在于包括：精子顶体酶底物修饰的金电极，所述精子顶体酶底物物理吸附或偶联于所述金电极表面，适于使精子顶体酶专一结合并水解所述精子顶体酶底物的磷酸盐缓冲液，以及说明书，其中记载的所述试剂盒的使用方法包括如下步骤：将所述金电极分别于含有不同浓度精子顶体酶标准样品中充分浸渍，并分别测试所述金电极的阻抗，探知所述金电极的阻抗变化幅度与所述标准样品中精子顶体酶的浓度变化幅度呈正比，由此建立活性精子顶体酶浓度与电极阻抗的标准曲线；以及，将所述金电极分别于含有未知浓度精子顶体酶的待测样品中充分浸渍，并测试所述金电极的阻抗，再依据所述标准曲线而获知所述待测试样中精子顶体酶的浓度；其中，所述标准样品和待测样品均以所述磷酸盐缓冲液作为溶剂。