[发明专利]微孔膜渗透乳化制备固定醇脱氢酶的明胶微球的方法

摘要

本发明涉及一种微孔膜渗透乳化制备固定醇脱氢酶的明胶微球的方法。该方法步骤包括：将固体明胶和醇脱氢酶溶解于去离子水中，配制成称为水相的明胶/醇脱氢酶溶液；将油溶性乳化剂司班‑80加入到液体石蜡中，配制成称为油相的液体石蜡油；将微孔膜浸润于液体石蜡油中，按明胶/醇脱氢酶溶液与液体石蜡油的体积比，以压力使明胶/醇脱氢酶溶液透过微孔膜进入液体石蜡油，乳化形成W/O型乳液；向W/O型乳液加入戊二醛经交联、固化、洗涤和干燥得到固定醇脱氢酶的明胶微球。本发明的优点在于：制备条件温和，制备工艺简单易行，制备微球粒度均一，大小可控，储存稳定性好，使用过程醇脱氢酶的泄漏率低，耐酸碱环境能力强。

主权项

1.一种膜乳化法制备固定醇脱氢酶的明胶微球的方法，其特征在于是经过以下步骤：1）在以200转/分钟磁力搅拌和温度55℃条件下，向10毫升水中加入1克明胶干粉，维持此速度下磁力搅拌0.5小时，至明胶干粉完全溶解于水中，溶解后明胶浓度为0.1克/毫升，向该明胶溶液中加入醇脱氢酶1毫克，溶解后醇脱氢酶浓度为0.1毫克/毫升，以上述明胶/醇脱氢酶水溶液作为水相；2）将油溶性乳化剂司班‑80加入到60毫升的液体石蜡中，司班‑80质量为液体石蜡质量的1.5%；以200转/分钟速度磁力搅拌30分钟，至司班‑80完全溶解，并将上述溶液加热至60℃作为油相；3）膜乳化过程：采用管状ShirasuPorousGlass微孔膜，膜管直径为1厘米，长度为2厘米，膜孔径为3.5微米；使用前需要预先将微孔膜浸润于预热至60℃的液体石蜡中30分钟，然后将微孔膜装入膜乳化装置中，即快速将上述制备好的水相明胶/醇脱氢酶水溶液加入膜乳化装置，通入氮气，在5kPa压力下使水相溶液通过微孔膜进入磁力搅拌的60℃油相中，得到液滴均匀的W/O型乳液，搅拌速度为400转/分钟；4）将所得乳液继续在400转/分钟下磁力搅拌15分钟后，迅速置于4℃冰水浴中，加入交联剂戊二醛1mL，交联固化2小时；结束后，分别用异丙醇和丙酮进行洗涤至油相组分完全去除，然后在空气中自然干燥得到固定醇脱氢酶的明胶微球。