[发明专利]基于腐殖质含量的发酵腐熟度判定法

摘要

本发明涉及发酵技术领域，具体的说是一种基于腐殖质含量的发酵腐熟度判定法，腐殖质类物质包括胡敏酸HA，富里酸FA和胡敏素HM，其特征在于，在高温好氧发酵过程中先后依次多点采样，通过测定样品中胡敏酸HA及富里酸FA的光谱特征变化，判断发酵腐熟度和发酵质量，凝胶色谱分析方法；本发明关于发酵腐熟度的判定方法，利用凝胶色谱分析手段对好氧发酵过程中胡敏酸及富里酸含量进行分析，从腐殖质的量变角度可准确判断好氧发酵腐殖化过程及腐熟度，为后续资源化利用提供数据支持。

主权项

一种基于腐殖质含量的发酵腐熟度判定法，腐殖质类物质包括胡敏酸HA，富里酸FA和胡敏素HM，其特征在于，在高温好氧发酵过程中先后依次多点采样，通过测定每组样品中胡敏酸HA及富里酸FA的光谱特征变化，判断发酵腐熟度和发酵质量，包括以下步骤：(1)提取胡敏酸HA及富里酸FA：每组样品中称取一定量风干样品，按照固液比W/V，以干重计1:20，用0.1mol/LNa4P2O7+0.1mol/LNaOH于40℃水浴浸提24h，于4000r/min下离心20min，上清液0.45μm滤膜过滤，得到腐殖酸提取液，取一定量腐殖酸提取液，用6mol/LHCl调制至pH1.0‑2.0，置于60℃水浴中4h，使溶液中胡敏酸与富里酸充分分离，于4000r/min下离心20min得到胡敏酸HA沉淀，过滤沉淀获得胡敏酸HA提取物以及富里酸FA提取液，把胡敏酸HA提取物用0.1mol/L HCl+0.3mol/L HF的混合液脱盐纯化，将纯化后的胡敏酸HA提取物于80℃干燥至恒重，密封保存；(2)凝胶色谱分析方法：装填葡聚糖凝胶，总体积303ml，装填高度67cm，内径25mm的玻璃柱作为色谱柱，分别取1.0ml HA提取液和1.0ml FA提取液缓慢加入凝胶表层,用pH＝6.8的超纯水作为洗脱液，用蠕动泵控制流速为1.0ml/min，自动收集器每5ml收集样品一次，用1.0ml 2％葡聚糖溶液测得空隙体积为100ml，收集的样品洗脱液测定280nm的吸光度，并根据洗脱液体积和对应的吸光度绘制出洗脱曲线，根据所述洗脱曲线判定发酵腐熟度。