[发明专利]一种仔猪小肠上皮刷状缘的分离及提取方法在审
| 申请号： | 201510211305.1 | 申请日： | 2015-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN106190947A | 公开（公告）日： | 2016-12-07 |
| 发明（设计）人： | 黄翔;杨怀谷;李剑豪;张洁;李宝红 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院动物科学研究所 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510640 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及组织细胞分离技术领域，具体涉及一种仔猪小肠上皮刷状缘（brush border）的分离及提取方法。具体包括以下步骤：S1.取健康仔猪小肠段，纵向剪开，以等渗溶液冲洗肠壁去除内容物；S2.将小肠在低渗溶液中铺开，置于冰上，浸泡10~15分钟后，刮下肠上皮绒毛；5000~7000rpm匀浆搅拌5秒，过滤、离心收集沉淀；S3.用1×PBS重悬沉淀，震荡混匀后，2500~3500rpm离心；S4.重复S3步骤2~3遍，最后用1×PBS混匀沉淀，即得仔猪小肠上皮刷状缘。与传统制备方法相比，本发明调整了匀浆转速和洗涤转速，从而成功制得足量浓度且质量合格的刷状缘细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 仔猪 小肠 上皮 刷状缘 分离 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种仔猪小肠上皮刷状缘的分离及提取方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.取健康仔猪小肠段，纵向剪开，以等渗溶液冲洗肠壁去除内容物；S2.将小肠在低渗溶液中铺开，置于冰上，浸泡 10~15 分钟后，刮下肠上皮绒毛；5000~7000rpm匀浆搅拌5秒，过滤、离心收集沉淀；S3.用 1×PBS 重悬沉淀，震荡混匀后，2500~3500rpm离心；S4.重复S3步骤2~3遍，最后用1×PBS混匀沉淀，即得仔猪小肠上皮刷状缘。
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