[发明专利]一种液态发酵生产木聚糖酶的方法

摘要

本发明公开了一种通过溶氧和搅拌联动提高木聚糖酶活的液态发酵方法，属于生物化工技术领域。本发明根据木聚糖酶发酵过程的菌种生长和产酶特性，利用溶氧与搅拌联动分时段控制溶氧的调节方法，极大提高木聚糖酶的酶活，降低生产成本。该方法简单，易操作，适用于木聚糖酶生产的工艺调控，对于木质纤维素的生物加工和饲料行业酶制剂的研究与开发，具有重要的理论意义和应用价值。

主权项

1.一种液态发酵生产木聚糖酶的方法，采用溶氧和搅拌联动控制法制得，其特征在于，具体步骤如下：1）将里氏木霉在斜面试管内，28℃下培养3‑5天得到里氏木霉菌种，将里氏木霉菌种用无菌生理盐水冲洗，稀释配制成108cfu/mL的孢子悬乳液；2）将该孢子悬乳液以发酵培养基重量的10%的接种量接入装有发酵培养基的摇瓶内，在28～32℃条件下，培养1～2天得到培养瓶菌种；3）再将培养瓶菌种按种子培养基重量的10%接种到有种子培养基的种子罐中，在28‑34℃下，调节pH值为5.0，在转速为200rpm‑400rpm、通风比为1.0vvm‑2.0vvm、溶氧参数为15%‑45%的条件下发酵120h‑150h即可得到木聚糖酶，其中，该发酵过程包括发酵前期、发酵中期、发酵后期；所述的发酵前期，将培养瓶菌种接种到有种子培养基的种子罐的0‑4h，控制搅拌速度为200rpm，当进入发酵4h‑5h后，控制发酵罐内的温度为28℃，溶氧参数为15%‑20%，搅拌速度为200‑300rpm，通风比控制为1‑2vvm，罐内压力为0.1MPa；所述的发酵中期，发酵至28h，28h‑34h内，增加溶氧参数至30%‑45%，搅拌转速控制为300‑400rpm，通风比控制为1‑1.5vvm，罐内压力为0.1MPa；所述的发酵后期，发酵至40h‑42h后，将搅拌速度控制为350‑400rpm，溶氧参数控制为25%‑35%，通风比控制为1‑1.5vvm下，继续发酵至120h‑150h即可得到木聚糖酶。