[发明专利]一种酵母短肽与酵母细胞壁多糖的同步制备方法

摘要

本发明涉及制备方法，特别涉及一种酵母细胞短肽与酵母细胞壁多糖的同步制备方法，该方法以酿酒酵母为原料，首先对酵母菌体多次离心洗净，洗净后的菌体分散调浆，进行酶解自溶，离心，取上清喷雾干燥制备酵母短肽，沉淀进行高温抽提制备甘露聚糖和β‑葡聚糖；高温抽提后离心可以得到上清液和沉淀两部分；上清液经过浓缩、醇沉、干燥得到甘露聚糖；下层沉淀经过高速分散、酶解和高压微射流均质处理得到β‑葡聚糖，所采用的制备条件温和，不采用强酸、强碱和有机溶剂等对环境有害的试剂，且可实现产业化规模生产。

主权项

1.一种酵母短肽与酵母细胞壁多糖的同步制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将酿酒酵母加入去离子水中得到悬浮液，向所述悬浮液中加入中性蛋白酶进行酶解自溶，灭酶活后离心，得到上清a和沉淀a；(2)将所述上清a干燥后，即得酵母短肽；(3)向所述沉淀a中加入去离子水进行离心清洗得到沉淀a1，然后向沉淀a1中加入去离子水得到悬浮液，所述悬浮液抽提后离心，得到上清b和沉淀b；(4)将所述上清b浓缩，向所述浓缩后的上清b中加入乙醇进行醇沉，离心后得沉淀，所述沉淀经干燥后即得酵母细胞壁甘露聚糖；(5)向所述沉淀b中加入去离子水得到悬浮液，将所述悬浮液高速分散，将经高速分散后的悬浮液进行酶解处理，灭酶后得酶解液，然后进行高压微射流处理，离心后得沉淀，所述沉淀采用无水乙醇脱水后，经干燥即得酵母细胞壁β‑葡聚糖：步骤(1)中性蛋白酶的用量为200～300U/g，采用酶解进行自溶时，温度为40～60℃，时间为20～30h，pH值为6.0～8.0；步骤(3)的具体操作步骤为：向所述沉淀a中加入去离子水进行离心清洗得到沉淀a1，然后按质量比1：3～10向沉淀a1中加去离子水得到悬浮液，对所述悬浮液在90～100℃的条件下高温抽提3～6h，抽提结束后进行离心处理，分别得到上清b和沉淀b；所述离心处理的离心转速为4000～5000rpm，离心时间为10～20min；步骤(4)中，所述加入乙醇进行醇沉的步骤为：先用体积分数为50％～75％的乙醇进行沉淀，采用去离子水复溶，复溶后再次使用60％～80％体积分数的乙醇进行沉淀；步骤(5)的具体操作步骤为：按质量比1：4～6向所述沉淀b中加入去离子水得到悬浮液，采用高速分散器，在6000～8000rpm的条件下处理5～10min，得高速分散悬浮液，将所述高速分散悬浮液加入蜗牛酶或中性蛋白酶Neutrase进行酶解，酶的添加量为所述沉淀b质量的0.02～0.05％，在35～55℃的条件下酶解1～3h，灭酶后得酶解液，所述酶解液在压力100～200MPa和处理流量为20～200mL/min的条件下，高压微射循环处理3～6次，离心后得沉淀，所述沉淀采用无水乙醇脱水后，经干燥即得酵母细胞壁β‑葡聚糖。