[发明专利]一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法

摘要

一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，用磷酸缓冲液清洗，过滤，获得黑曲霉麸曲孢子悬液；(2)添加0.05％(v/v)的吐温80，超声波处理，获得分散均匀的单孢子悬液，调节孢子悬液浓度为106～107个/mL；(3)用磷酸缓冲液配置8～14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液；(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为11的比例于比色皿中混合均匀密封，反应420s，于663nm波长处扫描吸光度‑时间曲线；(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度，以吸光度的变化表征细胞活力大小。本发明可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率；其它微生物孢子活力评价，均适用本技术。

主权项

一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法，其特征在于包括如下步骤：(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，用磷酸缓冲液清洗麸曲孢子，用三层纱布过滤，获得黑曲霉麸曲孢子悬液；(2)在黑曲霉麸曲孢子悬液中添加0.05％(v/v)的吐温80，同时在超声波清洗仪中处理，获得分散均匀的单孢子悬液，并调节孢子悬液浓度为106～107个/mL；(3)用磷酸缓冲液配置8～14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液；(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为1:1的比例于比色皿中混合均匀，并用盖子密封，反应420s，于663nm波长处扫描吸光度‑时间曲线；(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度，以吸光度的变化表征细胞活力大小；步骤(1)与(3)缓冲液pH范围为6.5～9.0；步骤(2)超声波清洗仪处理时间为30～120s。