[发明专利]带鱼肝脏抗菌肽的制备方法有效
| 申请号： | 201510238562.4 | 申请日： | 2015-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN104892723B | 公开（公告）日： | 2020-11-10 |
| 发明（设计）人： | 郁迪;王斌;迟长凤;陈荫;赵玉勤;孙坤来 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋学院 |
| 主分类号： | C07K1/34 | 分类号： | C07K1/34;C07K1/22;C07K1/20 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 浙江省舟*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种带鱼肝脏抗菌肽的制备方法，该制备时以带鱼肝脏作为原料，经肝脏粗蛋白抽提、酶解、超滤和色谱制备，得抗菌肽。抗菌肽的氨基酸序列为Lys‑Val‑Phe‑Trp‑Gly‑Leu‑His‑Pro，ESI‑MS检测分子量为983.15 Da。本发明制备的抗菌肽Lys‑Val‑Phe‑Trp‑Gly‑Leu‑His‑Pro对革兰氏阴性菌、荧光假单孢菌、绿脓杆菌和革兰氏阳性菌、巨大芽孢杆菌、藤黄八叠球菌均有较强的抑制作用。 | ||
| 搜索关键词： | 带鱼 肝脏 抗菌 制备 方法 | ||
【主权项】：
带鱼肝脏抗菌肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）带鱼肝脏酶解物的制备：带鱼肝脏从冰冻带鱼中取出、解冻，用高速组织捣碎机匀浆，然后按照固液比1 g：8～10mL加入0.02 mol/L，pH 6.5～7.5的磷酸盐缓冲液混匀，并加热至20～30℃；在功率为900W，频率为30～50kHz 超声波发生器内超声提取90～120 min，按照肝脏质量的0.3～0.5%加入中性蛋白酶，于温度55～65℃下酶解6～8 h，10 000 r/min离心25～30 min，取上清液采用3 kDa超滤膜进行超滤处理，收集分子量小于3 kDa部分，冷冻干燥，得超滤酶解物；2）带鱼肝脏抗菌肽的制备：将制备的带鱼肝脏超滤酶解物依次经大孔树脂除杂、凝胶过滤层析、细胞膜色谱纯化和反相高效液相色谱（RP‑HPLC）制备，得到带鱼肝脏抗菌肽。
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