[发明专利]一种非人灵长类动物血管内皮祖细胞的高效扩增培养体系

摘要

本发明涉及一种非人灵长类动物血管内皮祖细胞的高效扩增培养体系。提供了一种新型的非人灵长类动物血管内皮祖细胞高效扩增培养方法，该方法可以高效地获得具有内皮活性功能的内皮祖细胞/内皮细胞，从而满足在灵长类动物自体回输移植的临床前研究中所需要的细胞数量，为内皮祖细胞扩增培养技术应用于临床上治疗提供了有效途径。

主权项

1.一种培养非人灵长类动物血管内皮祖细胞的方法，其特征在于，所述方法包括：(1) 利用干细胞扩增培养基扩增非人灵长类动物CD34⁺单个核细胞；(2) 将步骤(1)扩增后的细胞转移到内皮祖细胞培养基中培养，获得非人灵长类动物血管内皮祖细胞；其中，所述的干细胞扩增培养基由干细胞基础培养基以及如下细胞因子组成：干细胞因子：50‑500 ng/mL；Flt3‑配体：50‑500 ng/mL；血小板因子TPO：5‑200 ng/mL；白介素3：5‑50 ng/mL；粒细胞集落刺激生物因子：5‑25ng/mL；粒细胞集落刺激因子：5‑25ng/mL；Sall样蛋白4B：1‑10 ng/mL；和血管内皮生长因子：15‑150ng/mL；其中，所述的内皮祖细胞培养基由内皮细胞基础培养基以及如下组分组成：血管内皮生长因子：5‑100ng/mL；胰岛素样生长因子：5‑100 ng/mL；表皮细胞生长因子：2‑20 ng/mL；成纤维细胞生长因子：5‑100 ng/mL；抗坏血酸：0.5‑6μg/mL；肝素：40‑200U/mL；氢化可的松：80‑300ng/mL；和L谷胺酰胺：1‑6mM。