[发明专利]复合微生物制剂及制备方法和在处理动物尸体中的应用

摘要

本发明公开了复合微生物制剂，包含嗜热脂肪芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、嗜热链球菌、巨大芽孢杆菌和弯曲芽孢杆菌。本发明还公开了该复合微生物制剂的制备方法和在处理动物尸体中的应用。本发明相比现有技术具有以下优点：本发明的复合微生物制剂能够高效、快速的分解动物尸体及秸秆辅料中的脂肪和纤维素等不易分解的大分子化合物，将动物尸体转化成油脂含量低的有机肥料；本发明的复合微生物制剂还具有高效的除臭功能，能够有效地减少处理过程中NH₃和H₂S的释放量，降低臭味浓度，达到无臭处理。最终高效、安全、环保地把动物尸体处理成有机肥料，达到动物尸体的资源化利用。

主权项

1.复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(一)活化菌种分别将复合微生物制剂的各个菌种接种到各个菌种对应的斜面培养基上培养，其中嗜热脂肪芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、巨大芽孢杆菌和弯曲芽孢杆菌接种到LB培养基上，30～40℃培养24～36小时，嗜热链球菌接种到MRS培养基上，30～37℃培养36～48小时，将各个菌种活化；(二)三角摇瓶培养分别将步骤(一)活化的各个菌种接种到各个菌种对应的三角瓶液体培养基上摇瓶培养，其中嗜热脂肪芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、巨大芽孢杆菌和弯曲芽孢杆菌接种到LB培养基上，摇床转速150～160rpm，30～40℃培养24～36小时；嗜热链球菌接种到MRS培养基上，摇床转速150～160rpm，30～37℃培养36～48小时，得到各个菌种的三角瓶培养液；(三)混合种子液的制备分别将步骤(二)制得的各个菌种的三角瓶培养液按质量百分比为5％的量接种到装有种子培养基的种子罐中，所述种子培养基由以下质量百分比的原料组成：蛋白胨15～25％，酵母膏1～2％，玉米粉1～2％，磷酸氢二钾0.2～0.4％，磷酸二氢钾0.3～0.6％，硫酸镁0.005～0.01％，余量为水；种子罐中培养通气量为1︰1～1.5，培养温度30～35℃，搅拌速度150～160rpm，培养时间为48～72h，得到各个菌种的种子液；活菌计数：按照下述各个菌种的活菌数占总菌数的百分比将上述制得的各个菌种的种子液混合制成混合种子液：嗜热脂肪芽孢杆菌的菌数占总菌数的20～30％，铜绿假单胞菌的菌数占总菌数的20～30％，嗜热链球菌的菌数占总菌数的10～20％，巨大芽孢杆菌的菌数占总菌数的20～30％，弯曲芽孢杆菌的菌数占总菌数的20～30％，且该混合种子液中总菌数大于等于5.0×10⁹cfu/mL；(四)混合发酵向发酵罐中加入液体发酵培养基，所述液体发酵培养基由以下质量百分比的原料组成：蛋白胨15～25％，酵母膏1～2％，玉米粉1～2％，磷酸氢二钾0.2～0.4％，磷酸二氢钾0.3～0.6％，硫酸镁0.005～0.01％，余量为水；并经121℃灭菌20分钟，待发酵罐温度降至40℃以下，在发酵罐运作的情况下喷入步骤(三)得到的混合种子液；发酵罐中培养通气量为1︰1～1.5，培养温度30～35℃，搅拌速度150～160rpm，培养时间为48～72h，得到混合发酵液，对所述混合发酵液活菌计数，总菌数大于等于5.0×10⁹cfu/mL；(五)制成菌粉(1)制作固体发酵培养基，所述的固体发酵培养基由以下质量百分比的原料组成：葡萄糖10～20％，豆粕粉50～70％，玉米粉20～40％；并经121℃高压蒸汽灭菌20分钟即得；(2)将步骤(四)得到的混合发酵液的pH调节为6.5～7.5，按25～35％的质量百分比加入所述的固体发酵培养基中，然后在固体发酵罐中30～35℃培养36～48小时，得到固体发酵产物；(3)配制菌粉保护剂，所述的菌粉保护剂由以下质量百分比的原料组成：脱脂奶粉1.5～2.5％，甘油2.0～3.0％，蔗糖0.5～1.0％，余量为蒸馏水；并经121℃高压蒸汽灭菌20分钟即得；(4)将所述菌粉保护剂按质量百分比为2～5％的比例加入所述的固体发酵产物中，搅拌1～2小时，得到混合湿料；(5)将所述的混合湿料制粒、干燥、粉碎，即得菌粉；(6)检验所得菌粉的活菌数大于等于5.0×10⁹cfu/g；(7)检验合格后包装成品。