[发明专利]一种基于酶法糖基化修饰的低致敏乳清蛋白粉及其制备方法

摘要

本发明涉及一种基于酶法糖基化修饰的低致敏乳清蛋白粉及其制备方法，属于乳制品加工技术领域；本方法采用转谷氨酰胺酶的催化特性，以及氨基糖的伯胺活性，通过酶法的糖基化途径将氨基葡萄糖导入到乳清蛋白分子中，达到改善乳清蛋白的致敏性的目的，本发明最终产品特点是将原料乳清分离蛋白的抗原活性降低30％以上的糖基化修饰产物。

主权项

一种基于酶法糖基化修饰的低致敏乳清蛋白粉的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)溶解乳清蛋白，在反应体系中乳清蛋白浓度为30～70g·L‑1，与氨基葡萄糖盐酸盐溶液混合，转谷氨酰胺酶的添加量为5～25U·g‑1乳清蛋白，pH为6.2～8.0，37℃恒温水浴震荡反应2～6h，反应结束后，取出样品，置于85℃水浴锅中灭酶5min，冷却，调节溶液pH值至5.0，加入等体积的无水乙醇，8000×g离心10min，收集沉淀，乙醇洗两次，将沉淀溶解并调节pH至7.0，冻干备用；(2)将步骤(1)得到的乳清蛋白糖基化交联修饰产物经盐酸水解后，通过高效液相色谱分析乳清蛋白糖基化修饰产品的水解物中释放的氨基葡萄糖的量，以此表示糖基的导入量；(3)通过间接酶联免疫吸附测定法分析步骤(1)得到的乳清蛋白糖基化交联修饰产物的抗原活性，以乳清蛋白中两种主要成份α‑乳白蛋白和β‑乳球蛋白的抗原活性表示。