[发明专利]一种光控胰岛素节律性分泌的组织工程装置

摘要

一种光控胰岛素节律性分泌的组织工程装置，有望代替胰岛素注射治疗糖尿病。其方法是：构建Gal4/UAS驱动表达的VP16‑CRY2‑IRES‑Gal4BD‑CIB1N的病毒表达载体和Gal4/UAS驱动表达的胰岛素病毒表达载体；分别包装成病毒，转染至皮肤来源的成纤维细胞，然后进一步将修饰的成纤维细胞加载至组织工程支架后，移植于皮下。待再生组织在体内稳定后，蓝光照射局部皮肤，诱导VP16‑CRY2和Gal4BD‑CIB1N相互作用，进一步引起自身表达增加，形成正反馈；同时促进另一个载体上胰岛素的分泌。当撤掉蓝光后，系统转为静息状态，胰岛素停止分泌。该组织工程装置有望按需分泌胰岛素。

主权项

1.一种组织工程支架，其特征在于，所述组织工程支架加载有修饰的成纤维细胞，所述修饰的成纤维细胞是由Gal4/UAS驱动表达的VP16‑CRY2‑IRES‑Gal4BD‑CIB1N的病毒表达载体和Gal4/UAS驱动表达的胰岛素病毒表达载体转染至皮肤来源的成纤维细胞后得到；所述Gal4/UAS驱动表达的VP16‑CRY2‑IRES‑Gal4BD‑CIB1N的病毒表达载体中含有编码序列SEQ ID No.1；所述Gal4/UAS驱动表达的胰岛素病毒表达载体中含有编码序列SEQ ID No.2；所述组织工程支架为聚乳酸‑羟基乙酸共聚物，制备方法如下：采用聚乳酸‑羟基乙酸共聚物制备5×3mm的支架，将3g的85∶15PLGA溶于30ml二氯甲烷，以直径为125‑500μm的NaCl晶体为致孔剂，将上述PLGA溶液倾倒于NaCl晶体上并搅拌均匀，同时使得液面高度为3mm，第二天，将上述固体用水洗涤，去除NaCl晶体，形成多孔的PLGA支架，最后采用直径为5mm的活检针打孔出直径为5mm的支架，‑20℃保存备用；所述加载的方法为：将含有修饰的成纤维细胞的悬液滴在组织工程支架上。