[发明专利]土壤降解菌及其组合对耕地胡敏酸降解的实验方法

摘要

本发明公开了土壤降解菌及其组合对耕地胡敏酸降解的实验方法，选取3株土壤胡敏酸降解菌，研究三者及其不同组合对耕地HA的降解程度及结构性质的影响。降解14天后，菌落数总量为T13＞T3＞T123＞T23＞T1＞T2＞T12，T1、T2的菌落数为T3的53.95％及26.98％，含1号菌的处理对芳香碳结构有较强的降解能力，HA培养基的腐殖化程度低于降解前，结构趋于简单，而2号菌这种能力。各处理脂类及含氮类物质较降解前分别增加了2.33-3.23倍及1.48-1.74倍，更说明了1号菌及其与3号菌的组合对于复杂有机碳的讲解能力和趋势。

主权项

土壤降解菌及其组合对耕地胡敏酸降解的实验方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)呼吸量碳测定：将90mm培养皿组合，连接处使用阿拉伯胶封口，外层粘贴封口膜以保证气密性，HA固体培养基粘附在顶部，以1.0mol·L^‑1的NaOH 10.0mL收集降解菌呼吸所释放的CO₂，每24h用0.5mol·L^‑1的HCl滴定一次，HCl具体浓度用Na₂B₄O₇·10H₂O标定，于28℃培养14d，滴定过程中为培养基补充3min无菌空气，该时间内所损失的CO₂量通过30min的CO₂吸收量换算；(2)培养结束后选取一个典型重复，将所有菌落挑出，之后使用NaOH与Na₄P₂O₇混合浸提剂进行HA二次提取，NaOH及Na₄P₂O₇浓度均为0.1mol·L^‑1，首先使用40mL浸提剂缓慢冲洗HA固体培养基，边冲洗边以0.45μm微孔滤膜过滤，该过程持续4h，之后使用100mL混合浸提剂分5次浸泡HA固体培养基，第4次时培养基已经透明，此时浸提工作已经基本完成，浸泡时间均为24h，所有浸提溶液均转移至150mL容量瓶用于测定红外光谱。