[发明专利]一种诱导金铁锁愈伤组织产生花青素的方法

摘要

本发明公开了一种诱导金铁锁愈伤组织产生花青素的方法，它是选择金铁锁无菌苗的幼嫩芽为外植体，在MS基本培养基，外加6‑BA 0.5 mg/L和IAA 2.5 mg/L的条件下诱导愈伤组织。将诱导产生的白色疏松愈伤组织置于MS基本培养基上，在添加6‑BA 0.5 mg/L和NAA 1.5 mg/L、光照2000 lx条件下培养可诱导花青素产生。再将诱导产生了花青素的愈伤组织进行继代增殖培养，以MS为基本培养基，添加6‑BA 1.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L和KT 0.3 mg/L，最终获得花青素含量较高的愈伤组织。本发明诱导产生的花青素是一种营养保健价值高、色泽艳丽的纯天然色素。

主权项

一种诱导金铁锁愈伤组织产生花青素的方法，其特征在于：以金铁锁种子萌发的无菌苗为材料经组织培养获得愈伤组织，通过对培养条件的调节诱导愈伤组织产生花青素；具体步骤如下：步骤1：采用金铁锁无菌苗的芽作为外植体，置于MS培养基、加6‑BA 2.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L进行培养，培养温度为25 ℃，光照强度为2000 lx，光照时间为12 h/d，诱导获得愈伤组织；步骤2：选择疏松或致密的愈伤组织，以MS为基本培养基，加6‑BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L在光照强度为2000 lx，光照时间为12 h/d条件下进行培养，7 d后白色愈伤组织上诱导红色花青素生成；步骤3：挑选步骤2得到的含有花青素的愈伤组织进行继代培养，以MS基本培养基外加6‑BA 1.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L和KT 0.3 mg/L进行培养，培养条件是：温度24～26 ℃，光照强度2000 lx、光照时间12 h/d，30 d后花青素明显积累；步骤4：选择相同培养条件下色素积累的愈伤组织，金铁锁愈伤组织花青素最大吸收峰在n=530 nm，色素含量表示为A530=Abs；以3%的盐酸‑甲醇为提取剂、料液比为1:10、提取时间20 h、提取温度30℃时提取，并以紫外分光光度计在200～650 nm下扫描。