[发明专利]基于单粒子脂质体计数的数字核酸杂交分析方法及试剂盒

摘要

本发明涉及一种基于单粒子脂质体计数的数字核酸杂交分析方法及试剂盒。该方法包括如下步骤：将脂质体与目标链混合，充分反应后，得到捕获液，脂质体包括纳米金及包覆于纳米金上的脂质膜，脂质体与目标链的摩尔比满足，充分反应后，部分脂质体上有且只有一条目标链，部分脂质体上没有目标链，连接有目标链的脂质体为目标对象，没有连接上目标链的脂质体为非目标对象；分离目标对象与非目标对象得到含目标对象的目标液；使目标链从脂质体上脱离得到中间液；使目标链及脂质体分离，得到含脂质体的检测溶液；采用生物质谱检测检测溶液，且单个脂质体线性通过质谱离子传输管。上述方法对于检测目标链具有较高的灵敏度与准确性。

主权项

1.一种基于单粒子脂质体计数的数字核酸杂交分析方法，其特征在于，包括如下步骤：将脂质体与目标链混合，充分反应后，得到捕获液，其中，所述脂质体包括纳米金及包覆于所述纳米金上的脂质膜，在所述捕获液中，所述目标链连接于所述脂质膜上，所述脂质膜的成分包括检测磷脂、捕获磷脂及构型磷脂，所述脂质体与所述目标链的摩尔比满足，充分反应后，部分脂质体上有且只有一条目标链，部分脂质体上没有目标链，连接有目标链的脂质体为目标对象，没有连接上目标链的脂质体为非目标对象；处理所述捕获液，以使所述目标对象与所述非目标对象分离，得到含目标对象的目标液；处理所述目标液，以使目标对象中的目标链从脂质体上脱离，得到中间液；处理所述中间液，以使所述中间液中的目标链及脂质体分离，得到含脂质体的检测溶液；以及采用生物质谱检测所述检测溶液，其中，在检测的过程中，单个脂质体线性通过质谱离子传输管；单个所述脂质体通过所述质谱离子传输管转化为一个检测磷脂的m/z峰、一个捕获磷脂的m/z峰及一个构型磷脂的m/z峰；通过检测其中一种磷脂的m/z峰的数目获得所述脂质体的数目。