[发明专利]短毛唇柱苣苔组培快繁方法

摘要

本发明公开了短毛唇柱苣苔组培快繁方法，包括以下步骤：外植体的建立；幼芽诱导阶段；增殖培养阶段：壮苗生根阶段；练苗及移栽；移栽后的短毛唇柱苣苔的试管苗3～4厘米，温室保持15～25℃的温度、70%以上的湿度、78～80%的遮阴并通风，试管苗即可正常生长，种苗的移栽成活率可达93％以上；薄肥勤施加强病虫害管护，建立短毛唇柱苣苔的种苗的规模化组培快繁方法。通过本方法，可大大提高种苗的繁殖系数，获得品相高度一致的种苗，便于大规模的工厂化种植，此项技术可广泛用于其它唇柱苣苔属植物的研究和开发，以及为其它珍稀植物的研究提供技术借鉴，在珍稀植物的保护开发及可持续利用方面具有十分重要的意义。

主权项

 短毛唇柱苣苔的组培快繁方法，其特征是包括以下步骤：①外植体的选择：选取生长健壮、无病虫害的短毛唇柱苣苔，在4‑6月份采用幼嫩叶片作为外植体；②丛生芽诱导阶段：选用生长健壮的叶片用70％的酒精浸泡30 秒，用无菌水冲洗2～3次；然后置于0.1％的升汞溶液中浸泡3～5分钟，无菌水冲洗4～5次；用镊子将消毒的叶片切成0.5cm×0.5cm大小接种到MS附加噻苯隆(TDZ)0.5mg/L及α‑萘乙酸（NAA）0.1mg/L的培养基上，25天左右诱导出约长0.3cm的丛生小芽；③增殖培养阶段：为获得更多的种苗，利用诱导出的丛生小芽接种在MS附加6‑苄基氨基嘌呤(6‑BA)0.1mg/L及α‑奈乙酸（NAA）0.1mg/L培养基上，经25天培养，形成芽的丛生植株,增殖系数平均可达到15.0；④生根阶段：将诱导的丛生植株分开，接种到添加吲哚乙酸（IBA）0.1mg/L、α‑奈乙酸（NAA）0.1mg/L、及活性炭（AC）2g/L 的1/2 MS培养基上培养，15天后长成具3～4条根、4～6片叶的完整植株；⑤炼苗及移栽：选择已生根且生长健壮的短毛唇柱苣苔再生植株，打开瓶盖，室内炼苗5天后，洗去根上附着的培养基，将小苗移栽在经0.1%（质量百分数）高锰酸钾消毒的腐殖土+珍珠岩 = 3:1（体积比）基质中温室内培养，每3天喷洒不加激素和蔗糖的MS液体培养基；温室要求保持15℃～25℃温度、70%以上湿度、70～80%的遮荫并通风，短毛唇柱苣苔即可正常生长，种苗的移栽成活率可达93％以上；通常15天浇一次有机肥发酵的油枯水或稀释到1000倍液磷酸二氢钾叶面肥，薄肥勤施，并加强病虫害管护措施，即建立短毛唇柱苣苔种苗的规模化组培快繁方法。