[发明专利]一种白接骨的组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种白接骨的组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤①丛生芽的诱导3月取材的外植体在添加了6‑BA+NAA 的MS基本培养基培养到芽长3 cm时取出，沿着茎切将两侧腋芽分开，然后转移接种于添加了6‑BA +ZT的第一MS基本培养基，②不定芽的增殖生长将上步诱导产生的丛生芽切成2‑3个一组，转接于添加了6‑BA +ZT +NAA的第二MS基本培养基；③不定芽的生根培养将上步增殖培养获得的不定芽丛切成单个不定芽，转接到添加了NAA的1/4强度的MS基本培养基中；④再生苗的炼苗和移栽。采用本发明的方法，能够快速地获得白接骨再生苗植株，利于产业化生产。

主权项

一种白接骨的组织培养快速繁殖方法，其特征在于依次包括以下步骤：①丛生芽的诱导：3月取材的外植体在添加了6‑BA 1.5 mg/L+NAA 0.15 mg/L 的MS基本培养基培养到芽长3 cm时取出，沿着茎中间将两侧的腋芽切开分离，然后转移接种于第一MS基本培养基，置于培养室光照培养，培养条件为：培养温度为(25±1)℃，光照时间为14 h光/10 h暗（14小时光照培养，10小时黑暗中培养循环交替），光照强度30.1‑40 μmol/(m2·s)；所述的第一MS基本培养基添加了：6‑BA 2.0 mg/L +ZT 0.5 mg/L；②不定芽的增殖生长：将上步诱导产生的丛生芽切成2‑3个一组，转接于第二MS基本培养基，置于培养室光照培养；所述的第二MS基本培养基添加了：6‑BA 2.0 mg/L +ZT 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L；③不定芽的生根培养：将上步增殖培养获得的不定芽丛切成单个不定芽，转接到添加了IBA 0.1‑1.0 mg/L的1/4强度的MS基本培养基中；所述1/4强度指的是MS基本培养基中各组分均是原配方浓度的1/4浓度；④再生苗的炼苗和移栽：将上步完成生根培养的不定芽的培养瓶打开一条缝，让其与外部空气相通，6 h后半开瓶盖，加入少量无菌水以保持培养基的湿润，过1d后完全打开瓶盖，让它完全接受培养室的日光灯管的直接光照2d后，将培养基捣碎，小心取出带少量琼脂的再生苗植株，在缓慢流水中用软刷仔细清洗根部沾有的琼脂块，将清洗干净的再生苗植株移栽至添加蛭石的消毒土中，在培养容器上罩以聚乙烯塑料薄膜以保持培养容器的湿度，培养容器置于阴凉地，5天即揭开塑料薄膜，于阴凉处培养7d后移至大田。